复方贞术调脂方调节巨噬细胞极化改善脂肪萎缩状态胰岛素抵抗的研究

发布时间：2023-04-25 00:27

　　目的:1、探讨脂肪代谢障碍导致的胰岛素抵抗aP2-SREBP1c转基因小鼠模型的脂肪萎缩状态对脂肪组织巨噬细胞极化的影响。2、给予冷刺激干预,探讨aP2-SREBP1c小鼠脂肪代谢障碍引起的脂肪萎缩状态下脂肪组织巨噬细胞极化的变化。3、给药FTZ干预,基于脂肪组织巨噬细胞极化探讨FTZ对改善aP2-SREBP1c小鼠脂肪萎缩状态胰岛素抵抗的作用。4、在冷刺激环境下,探讨FTZ改善aP2-SREBP1c小鼠脂肪萎缩状态胰岛素抵抗的影响及其可能机制。方法:将aP2-SREBP1c小鼠确认基因型后并根据体重、GLU、TG、TC等指标随机分组,每组分为2部分,分为4℃环境刺激部分(每天给予冷刺激4小时)和25℃常温室温环境部分(环境温度25±2℃)。每周观察体重变化,每隔2周取禁食血,动态观察GLU、TG、TC、HDL-C、LDL-C的水平;给药10周后利用小动物核磁共振全身成分分析仪检测小鼠脂肪含量;给药11周后,做口服糖耐量实验(OGTT);给药12周后取材,通过线粒体耗氧量实验检测棕色脂肪组织SVF细胞的细胞呼吸率;通过流式细胞术检测皮下脂肪组织SVF细胞中巨噬细胞的M1、M2型极化表型...

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 序言
    1.1 研究背景
        1.1.1 糖脂代谢病
        1.1.2 中医药复方防治糖脂代谢病
    1.2 文献综述
        1.2.1 脂肪组织对胰岛素敏感性的影响
        1.2.2 脂肪组织适应性产热与巨噬细胞相关的机制研究
        1.2.3 脂肪代谢障碍模型的研究进展
    1.3 研究路线
    1.4 小结
第二章 aP2-SREBP1c小鼠的表型研究
    2.1 前言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 实验试剂
    2.3 实验方法
        2.3.1 转基因动物繁殖
        2.3.2 动物分组
        2.3.3 脂肪组织含量检测
        2.3.4 口服糖耐量实验(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        2.3.5 胰岛素抵抗指数
        2.3.6 HE染色
        2.3.7 糖原PAS染色
        2.3.8 流式细胞术检测脂肪组织SVF细胞
        2.3.9 Trizol法提取总RNA
        2.3.10 总RNA逆转录反应
        2.3.11 RT-PCR
        2.3.12 引物序列
        2.3.13 棕色脂肪细胞线粒体耗氧量实验
        2.3.14 GC-MS法分析肝脏脂肪酸组分方法
        2.3.15 统计学处理方法
    2.4 实验结果
        2.4.1 aP2-SREBP1c小鼠的糖脂代谢状况
        2.4.2 aP2-SREBP1c小鼠的体脂水平
        2.4.3 aP2-SREBP1c小鼠的糖耐量
        2.4.4 aP2-SREBP1c小鼠的胰岛素水平、HOMA-IR
        2.4.5 aP2-SREBP1c小鼠体内的脂肪酸含量
        2.4.6 aP2-SREBP1c脂肪组织特异性过表达对小鼠棕色脂肪的影响
        2.4.7 aP2-SREBP1c脂肪组织特异性过表达对肝脏的影响
        2.4.8 aP2-SREBP1c脂肪组织特异性过表达对小鼠脂肪组织巨噬细胞极化的影响
        2.4.9 aP2-SREBP1c脂肪组织特异性过表达对小鼠脂肪组织炎症状态的影响
    2.5 小结
第三章 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠的影响
    3.1 前言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验动物
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 实验试剂
    3.3 实验方法
        3.3.1 动物分组
        3.3.2 冷刺激干预方法
        3.3.3 脂肪组织含量检测
        3.3.4 口服糖耐量实验(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        3.3.5 胰岛素抵抗指数
        3.3.6 HE染色
        3.3.7 RT-PCR检测实验
        3.3.8 引物序列
        3.3.9 统计学处理方法
    3.4 实验结果
        3.4.1 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠糖脂代谢的影响
        3.4.2 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠中心体温的影响
        3.4.3 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠体脂的影响
        3.4.4 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠糖耐量的影响
        3.4.5 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠胰岛素水平、HOMA-IR的影响
        3.4.6 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织状态的影响
        3.4.7 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织巨噬细胞极化的影响
        3.4.8 冷刺激对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织脂肪因子的影响
    3.5 小结
第四章 基于脂肪组织巨噬细胞极化,复方贞术调脂方改善aP2-SREBP1c小鼠胰岛素抵抗的药效及机制研究
    4.1 前言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验动物
        4.2.2 干预药物
        4.2.3 实验仪器
        4.2.4 实验试剂
    4.3 实验方法
        4.3.1 动物分组
        4.3.2 给药干预方法
        4.3.3 脂肪组织含量检测
        4.3.4 口服糖耐量实验(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        4.3.5 胰岛素抵抗指数
        4.3.6 HE染色
        4.3.7 流式细胞术检测脂肪组织SVF细胞
        4.3.8 Trizol法提取总RNA
        4.3.9 总RNA逆转录反应
        4.3.10 RT-PCR
        4.3.11 引物序列
        4.3.12 棕色脂肪细胞线粒体耗氧量实验
        4.3.13 GC-MS法分析肝脏脂肪酸组分方法
        4.3.14 统计学处理方法
    4.4 实验结果
        4.4.1 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠糖脂代谢的影响
        4.4.2 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠糖耐量的影响
        4.4.3 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠胰岛素水平、HOMA-IR的影响
        4.4.4 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂质异位沉积的影响
        4.4.5 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠棕色脂肪细胞呼吸率的影响
        4.4.6 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织巨噬细胞极化的影响
        4.4.7 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织炎症因子水平的影响
        4.4.8 FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织脂肪调节因子的影响
    4.5 小结
第五章 冷刺激条件下,FTZ改善aP2-SREBP1c小鼠胰岛素抵抗的药效研究
    5.1 前言
    5.2 实验材料
        5.2.1 实验动物
        5.2.2 实验仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 动物分组
        5.3.2 给药干预方法
        5.3.3 冷刺激干预方法
        5.3.4 脂肪组织含量检测
        5.3.5 口服糖耐量实验(OralGlucoseToleranceTest,OGTT)
        5.3.6 胰岛素抵抗指数
        5.3.7 HE染色
        5.3.8 RT-PCR检测实验
        5.3.9 引物序列
        5.3.10 统计学处理方法
    5.4 实验结果
        5.4.1 冷刺激条件下,FTZ对aP2-SREBP1c小鼠体温变化的影响
        5.4.2 冷刺激条件下,FTZ对aP2-SREBP1c小鼠体脂的影响
        5.4.3 冷刺激条件下,FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织的影响
        5.4.4 冷刺激条件下,FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织巨噬细胞极化的影响
        5.4.5 冷刺激条件下,FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织炎症因子的影响
        5.4.6 冷刺激条件下,FTZ对aP2-SREBP1c小鼠脂肪组织脂肪调节因子的影响
    5.5 小结
第六章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 展望
参考文献
附录
致谢



本文编号：3800331