中成药儿童清肺丸和止嗽化痰丸物种组成鉴定研究

发布时间：2023-04-25 01:45

　　物种组成鉴定研究是中成药质量评价体系的关键问题之一。传统中成药质量评价方法包括性状鉴别、显微鉴别、理化技术等,对于形态相似的近缘物种和含有相同化学成分的物种难以区分,制剂中未知有毒有害或者濒危珍稀物种成分无法检测,因此,有必要结合分子生物学方法鉴定中成药复杂的物种组成信息。马兜铃酸类物质(AAs)由于具有不可逆转的肾脏毒性被列为Ⅰ级致癌物,主要来自马兜铃属、细辛属等马兜铃科植物。目前,一些含AAs植物仍作为传统药物使用,对公众健康的获益—风险评估值得关注。本论文首先选取2015年版《中国药典》收载的两种含马兜铃科植物的清肺化痰中成药——儿童清肺丸和止嗽化痰丸为研究对象,结合分子生物学及化学方法,以期建立一种准确、有效的中成药物种组成鉴定研究方法;然后,采取相关分子生物学技术——TaqMan探针实时荧光PCR法,验证重要组分是否存在,并以冬虫夏草及易混品,泽泻及近缘物种东方泽泻为例开展方法测试研究。主要研究内容及结果如下:1.建立二代测序技术、TaqMan探针实时荧光PCR技术和液质联用技术相结合的方法,开展中成药儿童清肺丸的物种组成鉴定研究。二代测序结果显示,除法半夏、橘红、石膏和锻靑...

【文章页数】：134 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 AAs抗肿瘤活性
    2 AAs及含AAs药材的肝脏毒性
    3 AAs的肾毒性及致癌机制
    4 控制Ⅰ级致癌物AAs的方案
    5 结语及展望
    6 本课题研究的创新点、目的及意义
    参考文献
第二章 中成药儿童清肺丸物种组成鉴定研究
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果与分析
        3.1 实验药材及饮片基原物种的鉴定
        3.2 中成药儿童清肺丸DNA质量检测
        3.3 中成药儿童清肺丸PCR产物文库构建
        3.4 中成药儿童清肺丸二代测序数据分析
        3.5 中成药儿童清肺丸TaqMan探针实时荧光PCR的特异性
        3.6 中成药儿童清肺丸AAI含量测定
    4 讨论
    参考文献
第三章 中成药止嗽化痰丸物种组成鉴定研究
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果与分析
        3.1 实验药材及饮片基原物种的鉴定
        3.2 中成药止嗽化痰丸DNA质量检测
        3.3 中成药止嗽化痰丸PCR产物文库构建
        3.4 中成药止嗽化痰丸二代测序数据分析
        3.5 中成药止嗽化痰丸TaqMan探针实时荧光PCR的特异性
        3.6 中成药止嗽化痰丸AAI含量测定
    4 讨论
    参考文献
第四章 基于便携式和CFX96实时荧光PCR仪的冬虫夏草及其混伪品鉴定研究
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果与分析
        3.1 样品DNA质量
        3.2 实时荧光PCR鉴定的灵敏度
        3.3 实时荧光PCR特异性鉴定研究
        3.4 TaqMan探针实时荧光PCR法快速鉴别冬虫夏草标准流程
    4 讨论
    参考文献
第五章 基于DNA条形码和实时荧光PCR法的泽泻药材鉴定研究
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果与分析
        3.1 样品DNA浓度及纯度
        3.2 样品PCR扩增、鉴定情况
        3.3 东方泽泻和泽泻的种内种间变异分析
        3.4 东方泽泻和泽泻的聚类分析
        3.5 TaqMan探针实时荧光PCR鉴定
    4 讨论
    参考文献
第六章 主要结论与展望
    1 主要结论
    2 展望
附录
致谢
作者简介



本文编号：3800452