基于Sost/Wnt通路研究补肾健脾活血方对大鼠骨形成的影响

发布时间：2023-05-07 01:42

　　目的:利用腺病毒过表达和沉默技术研究Wnt信号通路抑制因子Sost在大鼠骨形成中的作用,探索补肾健脾活血方对Sost,Wnt2,OPG和BMP2的影响。方法:1、实验动物:4月龄雌性SD大鼠28只。2、实验分组:分为A.空白对照组,B.空载腺病毒组,C.过表达Sost组,D.沉默Sost组,每组设置7只大鼠,共4组。3、给药方式及剂量:将包装好的大鼠腺病毒采用腹腔注射方法,注射量为病毒滴度(10¹⁰),200ul/只。空白对照组(A组)不注射病毒;空载腺病毒组(B组)腹腔注射空载腺病毒。过表达Sost组(C组)腹腔注射过表达Sost腺病毒,沉默Sost组(D组)腹腔注射沉默Sost腺病毒。4、1个月后,C组和D组的1-4号大鼠给予补肾健脾方中药灌胃,A组和B组的1-4号大鼠给予等量的生理盐水灌胃。2个月后,处死各组大鼠,检测大鼠股骨骨密度(BMD);(1)采用实时荧光定量PCR检测腺病毒过表达或沉默Sost后大鼠组织中Wnt2、OPG、Sost、BMP-2的基因表达情况。(2)采用WB技术检测通路蛋白Wnt2、OPG、Sost、BMP-2蛋白的表达。结果:1、腺病...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究
    第一节 OP的文献研究
        一、OP定义及诊断标准
        二、OP的流行病学概述
        三、骨相关细胞通路概述
        四、OP的中医认识
        五、药物治疗OP概述
    第二节 Sost、Wnt2、OPG和BMP-2的文献研究
        一、Sost与骨代谢
        二、Sost在治疗OP中的进展
        三、Wnt2与骨质疏松
        四、OPG与骨质疏松
        五、BMP-2与骨质疏松
    第三节 总结
第二章 基于Sost/Wnt通路研究补肾健脾活血方对大鼠骨形成的影响
    第一节 实验材料与方法
        一、实验动物
        二、实验试剂
        三、实验仪器
        四、适应性饲养并筛选SD大鼠
        五、将SD大鼠分组并标记
        六、构建大鼠过表达和沉默Sost腺病毒
        七、沉默和过表达重组腺病毒载体转染SD大鼠
        八、补肾健脾活血方的提取及灌胃
        九、取材
        十、测定骨密度
        十一、PCR检测
        十二、WB检测
        十三、统计学处理
    第二节 实验结果
        一、腺病毒含量定性分析
        二、各组大鼠股骨骨密度(BMD)变化
        三、补肾健脾活血方对大鼠Wnt2、OPG、BMP-2 mRNA的影响
        四、补肾健脾活血方对大鼠Wnt2、OPG、Sost、BMP-2蛋白的影响
第三章 讨论与分析
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
    发表论文
    参与课题
致谢
附件



本文编号：3809998