紫草素通过抑制人睾丸癌1-10和精原细胞瘤TCAM-2糖酵解诱导细胞死亡

发布时间：2023-05-07 01:45

　　目的探究紫草素对睾丸癌细胞I-10和精原细胞瘤TCAM-2死亡形式的影响,并从线粒体功能和糖酵解方面探讨其可能机制。方法 I-10细胞组加入浓度分别为0μmol/L(对照组)、1.2、1.4、1.6μmol/L的紫草素,TCAM-2细胞组加入浓度分别为0μmol/L(对照组)、0.5、1、1.5μmol/L的紫草素,JC-1试剂盒和ROS试剂盒分别用来检测线粒体膜电位和活性氧的变化;乳酸试剂盒检测胞内乳酸变化;MTT法检测细胞增殖抑制;透射电镜观察细胞死亡形式;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot法检测线粒体通路相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3和自噬相关蛋白LC3B以及糖酵解相关蛋白PKM2、GLUT1、HK2的相对表达水平。结果 MTT结果表明,紫草素能够随时间和剂量依赖性的抑制I-10和TCAM-2细胞的增殖(P<0.05),I-10组24、48、72 h的IC₅₀值分别为1.8、1.36和1.16μmol/L,TCAM-2组24、48、72 h的IC₅₀值...

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验材料、试剂
    1.2 细胞培养
    1.3 JC-1染色检测细胞线粒体膜电位差
    1.4 细胞内ATP水平检测
    1.5 活性氧（ROS）检测
    1.6 乳酸的测定
    1.7 MTT测定
    1.8 透射电子显微镜观察细胞死亡的方式
    1.9 Western blot法检测蛋白表达水平
    1.1 0 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡
    1.1 1 统计分析方法
2 结果
    2.1 紫草素对I-10和TCAM-2细胞线粒体功能的影响
    2.2 紫草素对I-10和TCAM-2细胞糖酵解的影响
    2.3 紫草素对I-10和TCAM-2细胞增殖和凋亡的抑制作用
    2.4 紫草素诱导I-10和TCAM-2细胞增加自噬
3 讨论



本文编号：3810001