基于分子对接探究知母皂苷BⅡ对破骨细胞分化过程中的影响

发布时间：2023-05-19 04:26

　　目的:探究知母皂苷BⅡ(TBⅡ)对破骨细胞分化过程中核转录因子-κB受体活化因子配基(RANKL),RANK,原癌基因(C-FOS)基因表达量的影响。方法:利用分子对接软件LeDock对TBⅡ分别与RANKL,RANK和C-FOS进行分子对接打分。RAW264.7细给予可溶性RANKL(sRANKL)干预,设立空白组,sRANKL组(模型组),淫羊藿苷(Ica)组,TBⅡ低剂量组(2μmol·L-1),TBⅡ中剂量组(4μmol·L-1),TBⅡ高剂量组(8μmol·L-1)。相应试剂盒检测破骨细胞分化的标志性酶(TRAP),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测C-FOS,与其上游RANKL/RANK和下游活化T细胞核因子胞质1型(NFATC1)表达量,以及骨保护素OPG的表达量。结果:分子对接打分结果分别为-11.86,-11.38,-12.34 kcal·mol-1,TBⅡ能够与RANKL,RANK和C-FOS结合。与正常组比较,模型组TRAP含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组显著降低TRAP含量(P<0.01),且TBⅡ呈剂量...

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【文章目录】：
1 材料
    1.1 单体和试剂
    1.2 细胞
    1.3 仪器
2 方法
    2.1 分子对接
    2.2 主要试剂的配置
        2.2.1 sRANKL母液的配制
        2.2.2 MTT母液的配制
        2.2.3 TBⅡ母液的配制
        2.2.4 Ica母液的配制
    2.3实验细胞的分组与给药
    2.4 MTT比色法检测细胞存活率
    2.5 RAW264.7细胞的抗酒石酸酸性磷酸酶含量的测定
    2.7 统计学处理
3 结果
    3.1 分子对接结果
    3.2 sRANKL诱导RAW264.7细胞分化条件的确定
    3.3 对RAW264.7细胞增殖活性的影响
    3.4 对RAW264.7细胞TRAP水平的影响
    3.5 对RAW264.7细胞RANKL,RANK,C-FOS,NFATC1,OPG mRNA表达的影响
4 讨论



本文编号：3819653