白藜芦醇清除朊病毒前后神经生长因子及相关激酶变化的研究

发布时间：2023-07-24 19:58

　　朊病毒病(Prion disease),又称可传播性海绵状脑病(Transmissible spongiform encephalopathies,TSE),是一类侵袭人和多种动物中枢神经系统的退行性疾病,其潜伏期长,致死率100%。神经生长因子(neurogrowth factor,NGF)对神经的生长、分化、发育以及神经元存活具有重要作用。临床研究表明,NGF对阿尔兹海默症和帕金森综合征等神经退行性疾病有一定治疗效果,但在朊病毒病中研究甚少。近期研究显示,白藜芦醇具有清除朊病毒复制的能力,对朊病毒病有一定的治疗潜力。为了明确朊病毒感染前后和白藜芦醇清除朊病毒后神经生长因子(NGF)及其上游级联反应调控因子的潜在变化。我们通过Western blot、免疫组织荧光、细胞免疫荧光实验,检测了小鼠中胚层脑(SMB)细胞系及细胞裂解液颅内接种的小鼠中NGF及其上游调控因子表达水平的变化情况。体外和体内实验结果显示,朊病毒感染后NGF表达水平显著降低,经白藜芦醇处理去除朊病毒后NGF含量得到一定程度的恢复。并且形态学分析结果显示颅内NGF信号主要与神经元共定位,与增殖的星形胶质细胞和小胶质细...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 朊病毒病
        1.1.1 朊病毒病
        1.1.2 朊病毒病的感染途径及致病过程
        1.1.3 朊病毒病的诊断
    1.2 朊病毒
        1.2.1 朊病毒的发展
        1.2.2 正常朊蛋白(PrPC)
        1.2.3 异常朊蛋白(PrPSc)
        1.2.4 PrPC向 PrPSc转变的分子机制
    1.3 NGF及其上游激酶研究进展
        1.3.1 NGF的发现
        1.3.2 NGF与中枢神经系统
        1.3.3 NGF与阿尔兹海默症
        1.3.4 NGF作为AD和 PD的治疗策略
        1.3.5 NGF上游相关激酶研究进展
    1.4 白藜芦醇
        1.4.1 白藜芦醇简介
        1.4.2 白藜芦醇与阿尔兹海默症
        1.4.3 白藜芦醇与帕金森综合征
        1.4.4 白藜芦醇与朊病毒病
2 材料与方法
    2.1 实验仪器和材料
        2.1.1 朊病毒毒株、细胞和动物模型
        2.1.2 主要仪器及设备
        2.1.3 细胞培养相关试剂耗材
        2.1.4 免疫印迹相关试剂耗材
        2.1.5 免疫细胞荧光及免疫组织荧光相关试剂耗材
        2.1.6 常用培养基与试剂旳配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 脑组织匀浆的制备
        2.2.3 细胞裂解液的制备
        2.2.4 免疫印迹(Western blot)
        2.2.5 免疫荧光(IFA)及苏木素-伊红染色法(HE染色)
        2.2.7 统计学分析
3 结果与分析
    3.1 在体外和体内用白藜芦醇清除PrPSc可恢复NGF的表达水平
    3.2 小鼠脑组织中NGF主要在神经元表达,与增殖的星形胶质细胞和小胶质细胞无共定位
    3.3 朊病毒感染导致CREB活性降低并可通过白藜芦醇清除朊病毒后部分逆转
    3.4 朊病毒感染过程中NGF相关上游激酶CaMKIV和 CaMKK2 水平下降在白藜芦醇清除朊病毒后部分恢复
    3.5 白藜芦醇清除朊病毒后能够恢复朊病毒感染对CaMKK2 活性的抑制
4 讨论
5 全文结论
附录
参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3836413