滤纸辅助细胞膜垂钓技术和萝卜硫素提取初探

发布时间：2023-11-04 16:17

　　目的:1、建立滤纸辅助细胞膜(Cell membrane-coated filter papers,CMFPs)垂钓的方法,应用于筛选天然产物中潜在的活性成分,为新药研发提供新方法。2、从西兰花种子中提取萝卜硫素(Sulforaphane,SFN),为做成SFN制剂提供前期准备。方法:以兔红细胞为原材料,用低渗溶胀法获取红细胞膜(Cell membranes,CMs)。以物理吸附的原理,将CMs固定于滤纸上。通过CMs溶液固定前后的差值,优选出固定CMs量最大的滤纸。通过异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)和细胞膜红色荧光探针(1,1’-dioctadecyl-3,3,3’,3’-tetramethy-lindocarbocyanine perchlorate,Di I)对CMs染色,在倒置荧光显微镜下观察CMs,CMFPs和滤纸的荧光,确定CMs可以被固定在滤纸上。以维拉帕米,硫脲混合药液对CMFPs垂钓法进行选择性评价。将CMFPs应用于垂钓白芷药液中的潜在活性成分,与CMs垂钓的方法进行比较,并对活性成分进行网络药理学研究和分子对接评价...

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、滤纸辅助细胞膜垂钓技术
    1.1 材料与仪器
        1.1.1 实验试剂
        1.1.2 实验仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 CMs低渗溶胀破碎
        1.2.2 CMs的固定及上膜量的测定
        1.2.3 白芷提取液的准备
        1.2.4 CMs的FITC染色及DiI染色
        1.2.5 CMFPs垂钓
        1.2.6 CMs垂钓
        1.2.7 网络药理学分析
        1.2.8 活性成分与靶点的分子对接
    1.3 结果
        1.3.1 上膜量
        1.3.2 CMs荧光标记
        1.3.3 CMFPs垂钓法的选择性评价
        1.3.4 CMFPs垂钓白芷提取液
        1.3.5 与CMs垂钓法比较
        1.3.6 网络药理学分析
        1.3.7 分子对接结果
    1.4 讨论
    1.5 小结
二、萝卜硫素提取初探
    2.1 材料与仪器
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 SFN的粗提取
        2.2.2 高效液相色谱法
        2.2.3 酶解反应不同pH条件的考察
        2.2.4 SFN粗提取物的纯化
        2.2.5 SFN纯化物的鉴别
    2.3 结果
        2.3.1 SFN粗提取物及标准品色谱图
        2.3.2 标准曲线
        2.3.3 酶解反应不同pH条件的考察结果
        2.3.4 薄层色谱结果
        2.3.5 纯化产物与标准品色谱图对比
        2.3.6 SFN的纯化得率
        2.3.7 质谱图结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3860645