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eNOS介导的槲皮素抗心肌细胞缺氧/复氧损伤保护机制研究

发布时间:2024-05-10 18:49
  目的:槲皮素(Quercetin,Que),是日常食物存在的黄酮醇类物质,已经有大量的实验证实槲皮素能够改善多种原因引起的内皮功能障碍,抑制氧化应激反应和炎症反应,但目前在心肌细胞缺氧复氧损伤中,仍然缺乏实验数据证实槲皮素预处理与心肌细胞的NOS/NO信号通路的潜在关系。本课题拟构建体外心肌细胞缺氧复氧模型,深入探讨缺氧复氧损伤后槲皮素预处理对H9c2心肌细胞中NOS/NO信号通路的影响以及其心肌保护作用机制。进一步探讨NOS/NO信号通路中eNOS、iNOS和n NOS三者扮演的角色,阐述槲皮素可能的作用机制。方法:选取H9c2心肌细胞作为实验对象,构建缺氧复氧损伤(A/R)模型,模拟体内缺血再灌注(I/R)模型。MTS比色法检测各实验组细胞存活率,分光光度法检测各实验组培养基中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,采用Western blotting(免疫印迹)检测eNOS、iNOS和n NOS及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,分光光度法检测细胞内一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,流式细胞仪测定各实验组细胞内活性氧(ROS)的...

【文章页数】:50 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
英文缩写及全称和中文对照表
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 主要材料及试剂
    2.2 实验主要仪器和设备
    2.3 实验操作方法
        2.3.1 H9c2心肌细胞的培养
        2.3.2 H9c2心肌细胞缺氧复氧(A/R)损伤模型的构建
        2.3.3 分组及实验处理
        2.3.4 Western blotting法检测H9c2心肌细胞中蛋白的表达
        2.3.5 观察指标及方法
    2.4 数据处理
第3章 结果
    3.1 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞存活率的影响
    3.2 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响
    3.3 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后一氧化氮合酶(NOS)表达的影响
    3.4 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后一氧化氮(NO)释放的影响
    3.5 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后MDA及SOD、GSH-Px的影响
    3.6 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后ROS水平的影响
    3.7 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后Bcl-2表达的影响
    3.8 槲皮素预处理对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞凋亡的影响
第4章 讨论
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢
综述
    参考文献



本文编号:3968869

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