UPLC-DPPH-PAD-ESI-TOF/MS在线联用技术快速筛选丹参中的抗氧化成分

发布时间：2024-05-15 02:45

　　目的建立超高效液相色谱-(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)-二极管阵列检测器-电喷雾飞行时间质谱联用技术(UPLC-DPPH-PAD-ESI-TOF/MS)快速筛选鉴别天然产物中抗氧化成分的方法,并用于丹参中抗氧化成分的快速发现。方法采用WatersACQUITY UPLC HSS T3柱(100 mm×3.0 mm,1.8μm),以乙腈-0.2%甲酸水进行梯度洗脱,体积流量0.35mL/min实现丹参提取物的快速分析。柱后流出液与另一路DPPH溶液(0.3mL/min)通过三通阀注入PEEK反应线圈(内径0.25 mm,长度10 m)混合反应后流入检测器检测,检测波长为254和517 nm,通过517 nm下产生的负峰所对应的样品色谱峰来筛选丹参中的抗氧化成分。结果采用UPLC技术在低体积流量下实现样品的高效分离,避免了高体积流量引起的基线噪音、显著提高了在线筛选方法的分辨率和灵敏度,降低了溶剂消耗。采用该方法在丹参提取物中共筛选出31个抗氧化活性成分,采用PAD-ESI-TOF/MS初步鉴定出11种,活性验证实验表明,咖啡酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参素均具有较好抗氧化活性,其中,咖...

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【部分图文】：

图1丹参抗氧化成分筛选流程图

本研究通过色谱条件和在线筛选条件的系统优化，建立了基于UPLC-DPPH技术的抗氧化活性成分快速筛选技术体系，并通过高分辨TOF/MS技术对活性成分进行初步鉴别，为复杂基质天然产物中抗氧化成分的快速分析研究提供技术支持，具体流程图见图1。1仪器与材料

图2丹参提取物的UPLC图谱(254nm)

本研究所用抗氧化成分在线筛选条件是在前期建立的在线抗氧化筛选模型基础上进行了适当修改[9]。针对不同的筛选样本，其中活性成分类型、含量以及活性强弱具有较大差异，其相应的色谱分离溶剂体系和体积流量等会对筛选方法灵敏度、基线稳定性造成较大影响，因此，有必要对DPPH在线筛选条件进行系....

图3丹参抗氧化成分UPLC-DPPH筛选

按照最优化的筛选条件对丹参提取物进行在线抗氧化成分筛选，结果见图3。由图3可知，该提取物中共筛选出31个具有抗氧化活性的化合物。活性较明显的化合物多集中在前50min，根据反相色谱柱洗脱出峰极性规律特征可知，这些化合物极性相对较强，结合文献资料初步推断为为酚酸类成分。3.3质....

本文编号：3973783