白藜芦醇对钛颗粒诱导小鼠巨噬细胞形成的破骨细胞数量及F-actin环面积影响观察

发布时间：2024-11-30 11:53

　　 目的观察白藜芦醇对钛颗粒诱导小鼠巨噬细胞株RAW264. 7形成的破骨细胞数量及F-actin环面积影响,并探讨其机制。方法将小鼠巨噬细胞株RAW264. 7分为Sham组、Vehicle组、Low-Res组、Mid-Res组、HighRes组,Sham组加入完全培养基,Vehicle组加入钛颗粒+完全培养基,Low-Res组加入钛颗粒+完全培养基+白藜芦醇(1μmol/L),Mid-Res组加入钛颗粒+完全培养基+白藜芦醇(10μmol/L),High-Res组加入钛颗粒+完全培养基+白藜芦醇(15μmol/L)。各组细胞培养5天后,采用TRAP染色法检测各组破骨细胞数,采用鬼笔环钛染色法检测各组破骨细胞F-actin环面积,采用Realtime-PCR法检测各组细胞中TNF-α、IL-1βmRNA,采用ELISA法检测各组细胞中TNF-α、IL-1β蛋白,采用Western blotting法检测各组细胞p-p65、p-IκB蛋白。结果 Vehicle组可观察到较多体积较大、酒红色、内含多个细胞核的破骨细胞,而应用不同浓度白藜芦醇干预后,破骨细胞数随着药物浓度的增加而减少; Sha...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 白藜芦醇、钛颗粒、细胞及试剂
    1.2 实验材料处理及浓度确定
        1.2.1 钛颗粒去除内毒素
        1.2.2 白藜芦醇细胞毒性检测及实验浓度的确定
    1.3 细胞培养及分组
    1.4 各组破骨细胞数与F-actin环面积测算
    1.5 各组细胞中TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白检测
    1.6 各组细胞p-p65、p-IκB蛋白检测
    1.7 统计学方法
2 结果
    2.1 各组破骨细胞数与F-actin环面积比较
    2.2 各组细胞中TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白相对表达量比较
    2.3 各组细胞中p-p65、p-IκB蛋白相对表达量比较
3 讨论



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