小白菊内酯介导TLR4-STAT3交叉对话调控肝纤维化进程的研究
发布时间:2025-01-14 19:47
目的:研究小白菊内酯(Parthenolide,PNL)通过介导TLR4-STAT3交叉对话改善肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)活化导致肝纤维化的作用机制。方法:转化生长因子-β(TransformingGrowth Factor-β,TGF-β)10ng/ml刺激HSCs或者脂多糖(Lippolysaccharide,LPS)1μg/ml刺激小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,1h 后给予 PNL(1.56μM、3.125μM、6.25μM、12.5μM、25μM);或给予 PNL(12.5μM、25μM),TLR4 抑制剂 CLI-095(1Oμg/ml),STAT3 抑制剂Guggulsterone(25μM),4h后提取细胞总蛋白和RNA,通过蛋白印迹和RT-PCR方法测定细胞中纤维化指标α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Collagen type Ⅰ,Collagen-Ⅰ)等,炎症因子P2X7受体(P2X7r),半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Cysteine aspartic enzyme...
【文章页数】:37 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
第二章 实验方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验仪器
2.1.2 实验试剂
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 MTT实验
2.2.3 提取总蛋白
2.2.4 Western Blotting实验
2.2.5 RT-PCR实验
2.2.6 免疫荧光实验
2.3 统计学处理
第三章 实验结果
3.1 PNL对细胞存活率及肝纤维化标志物表达的影响
3.2 PNL对炎症指标表达的影响
3.3 PNL对凋亡指标表达的影响
3.4 PNL对TLR4信号通路蛋白表达的影响
3.5 PNL对JAK2/STAT3信号通路蛋白表达的影响
3.6 PNL对PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达的影响
3.7 PNL对TLR4-STAT3交叉对话中多种蛋白表达的影响
3.8 PNL对两种巨噬细胞存活率以及RAW264.7中TLR4-STAT3相关蛋白表达的影响
第四章 讨论
参考文献
谢辞
本文编号:4027098
【文章页数】:37 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
第一章 绪论
第二章 实验方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验仪器
2.1.2 实验试剂
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 MTT实验
2.2.3 提取总蛋白
2.2.4 Western Blotting实验
2.2.5 RT-PCR实验
2.2.6 免疫荧光实验
2.3 统计学处理
第三章 实验结果
3.1 PNL对细胞存活率及肝纤维化标志物表达的影响
3.2 PNL对炎症指标表达的影响
3.3 PNL对凋亡指标表达的影响
3.4 PNL对TLR4信号通路蛋白表达的影响
3.5 PNL对JAK2/STAT3信号通路蛋白表达的影响
3.6 PNL对PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白表达的影响
3.7 PNL对TLR4-STAT3交叉对话中多种蛋白表达的影响
3.8 PNL对两种巨噬细胞存活率以及RAW264.7中TLR4-STAT3相关蛋白表达的影响
第四章 讨论
参考文献
谢辞
本文编号:4027098
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