近红外荧光染料在胃癌模型研究中的应用

发布时间：2017-04-15 20:00

  本文关键词：近红外荧光染料在胃癌模型研究中的应用，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的建立人胃癌临床肿瘤标本移植(patient-derived tumor xenograft,PDX)模型和胃癌细胞移植(cell line-derived xenograft,CDX)模型,探讨近红外荧光(near-infrared fluorescence,NIRF)染料IR-783在胃癌PDX模型和CDX模型研究中的应用及特异性识别胃癌细胞的机制。材料与方法将新鲜的人胃癌肿瘤组织移植到裸鼠体内,待肿瘤形成后传代,传至第3代肿瘤生长稳定时,制定肿瘤生长曲线,观察肿瘤大小与近红外荧光强度的相关性;同时取每代部分肿瘤组织固定做HE染色并与原发肿瘤组织HE染色后的形态对比;制备人胃癌CDX裸鼠皮下移植模型,绘制荧光素酶(luciferase)与近红外荧光强度相关性曲线;取PDX模型肿瘤组织做原代细胞培养并制备裸鼠原位移植模型,模型建成后进行近红外荧光染料活体成像测试;研究NIRF染料在体外培养肿瘤细胞中的靶向定位,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测传代肿瘤组织中HIF1α,OATP,CK8/18和CEA的表达水平,实时荧光定量PCR技术检测胃癌肿瘤组织及胃癌细胞与正常组织中OATP亚型的表达量。结果成功建立了14个人体胃癌PDX模型,传代肿瘤组织与原发肿瘤组织病理形态结构基本相似,PDX模型肿瘤部位NIRF强度分别与肿瘤组织的大小和luciferase信号强度高度相关,NIRF染料能够在体外特异性的识别胃癌细胞并主要集聚在肿瘤细胞的线粒体与溶酶体中,胃癌肿瘤组织及胃癌细胞中HIF1α与OATP的表达量显著高于正常胃组织。结论PDX模型较好的保持了原发肿瘤的形态特征,NIRF染料可以用于肿瘤模型的活体成像,它在肿瘤细胞中的特异性集聚可能与肿瘤组织中HIF1α与OATP的高表达相关。
【关键词】：人源性肿瘤组织异种移植(PDX)模型 近红外荧光(NIRF)染料 低氧诱导因子(HIF1α) 有机阴离子转运肽(OATP)
【学位授予单位】：成都医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2;TQ617.3
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-15
• 1 材料与方法15-31
• 1.1 主要实验仪器15-16
• 1.2 主要试剂16-17
• 1.3 主要溶液的配制17-18
• 1.4 实验方法18-31
• 2 结果31-39
• 2.1 PDX模型的建立31
• 2.2 PDX模型肿瘤生长曲线31-32
• 2.3 PDX肿瘤组织与原发肿瘤组织H&E染色结果对比32-33
• 2.4 PDX模型肿瘤体积与肿瘤近红外荧光强度的关系33
• 2.5 胃癌瘤细胞裸鼠皮下移植瘤Luciferase信号与NIRF强度的一致性33-34
• 2.6 胃癌原位移植模型近红外影像信号与生物发光信号重合34-35
• 2.7 NIRF染料在肿瘤细胞中的定位35-37
• 2.8 PDX模型肿瘤组织中HIF1α，OATP1B3，CEA和CK8/18高表达37
• 2.9 RT-PCR结果显示肿瘤组织与肿瘤细胞中OATP亚型表达量增高37-39
• 3 讨论39-41
• 4 结论41-42
• 参考文献(References)42-49
• 文献综述49-60
• 参考文献（References）57-60
• 附录60-61
• 攻读学位期间的研究成果61-62
• 致谢62

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：309117