Nrf2对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移等作用的研究
发布时间:2017-04-28 16:25
本文关键词:Nrf2对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移等作用的研究,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:研究Nrf2、Keap1在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用。方法:1.免疫组织化学法检测89例宫颈癌,46例CINⅡ-Ⅲ组织及66例正常宫颈组织中Nrf2和Keap1蛋白的表达,分析其相关性及临床意义;2.实时荧光定量PCR技术检测宫颈癌HeLa,SiHa,C33a细胞中mRNA本底表达;3.构建Nrf2过表达质粒,上调C33a细胞中Nrf2表达,RNA干扰技术特异性沉默SiHa细胞中Nrf2表达,并通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测转染后mRNA和蛋白水平的变化,Transwell小室实验和流式细胞技术分析Nrf2对宫颈癌细胞迁移、侵袭、增殖和凋亡的影响。结果:1.宫颈癌组织中Nrf2的表达明显高于CIN和正常宫颈组织(P0.05),Keap1在宫颈癌组织的表达显著低于CIN和正常宫颈组织(P0.05),Nrf2的表达与淋巴结转移、肿瘤组织分化程度及临床分期有关(P0.05);2.HeLa、SiHa、C33a宫颈癌细胞株中Nrf2 mRNA存在不同程度过表达;3.上调Nrf2的表达后,mRNA和蛋白水平的表达均上调,并促进肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移,对细胞凋亡无明显影响(P0.05)。下调Nrf2的表达后,mRNA和蛋白水平的表达均下调,并抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡(P0.01)。结论:1.Nrf2蛋白在宫颈癌组织和细胞中高表达,Nrf2蛋白的表达与Keap1表达密切相关。2.上调Nrf2促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,但对细胞的凋亡无影响。
【关键词】:宫颈癌 Nrf2 Keap1 氧化应激
【学位授予单位】:新疆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R737.33
【目录】:
- 中英文缩略词对照表6-11
- 摘要11-12
- ABSTRACT12-13
- 前言13-15
- 研究内容与方法15-32
- 1. 研究对象15-18
- 1.1 组织及细胞株来源15
- 1.2 PCR引物和质粒信息15-16
- 1.3 主要试剂16-17
- 1.4 主要设备17-18
- 1.5 实验相关溶液配制18
- 2. 内容和方法18-30
- 2.1 免疫组织化学方法18-20
- 2.2 细胞转染及转染后鉴定20-27
- 2.3 转染后细胞生物学功能检测27-30
- 3. 统计学处理30-31
- 4. 技术路线图31-32
- 结果32-47
- 讨论47-53
- 小结53-54
- 致谢54-55
- 参考文献55-60
- 附录60-61
- 综述61-69
- 参考文献65-69
- 攻读硕士学位期间发表的学位论文69
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本文编号:333132
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