胃癌及转移淋巴结中Pokemon表达与肿瘤耐药关系的研究

发布时间：2017-04-29 19:08

  本文关键词：胃癌及转移淋巴结中Pokemon表达与肿瘤耐药关系的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:作为国内最常见消化系统恶性肿瘤中的一种,胃癌早期发现的不易导致临床病例往往处于进展期,伴有局部或远处转移,影响预后。化疗被纳入挽救胃癌病人生命有效疗法,可是多药耐药(multidrug resistance,MDR)致使部分病例失去疗效,为造成较高死亡率众因素之一。MDR为肿瘤细胞对某一特定药物及其他分子布局、起效途径不同的化疗药均表现耐药。它包括原发性和继发性耐药,前者指在化疗开始即对多种药物不敏感;后者指在开始化疗时有良好效果,接受一段时间的用药后对所用药物出现耐药性。MDR产生的机制复杂,是多基因、多途径综合调控的结果。Pokemon(POK erythroid myeloid ontogenic factor),POK红系髓性致癌因子,属于转录抑制因子POK家族,在胚胎生长、分化及癌形成历程起重要影响。研究表明Pokemon既能调控肿瘤细胞生长,还能通过多种机制对某些癌基因和抑癌基因进行调控,从而被称为肿瘤总开关。目前虽有资料表明Pokemon与多种恶性肿瘤发生、发展息息相关,但对它是否参与肿瘤多药耐药并不肯定。本课题以胃癌及相应转移淋巴结为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q PCR)以及免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-perosidase,SP)法检测Pokemon及四种肿瘤耐药相关因子mRNA及蛋白表达情况,并行噻唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]药敏性实验,探索Pokemon与肿瘤耐药相关蛋白以及Pokemon与化疗药敏性的关系,为临床治疗提供新的理论基础。方法:取40例进展期胃癌病人原发灶及对应转移淋巴结新鲜标本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应和免疫组织化学SP法检验Pokemon在原发灶及转移淋巴结的表达;选取免疫组化SP法检验胃癌原发灶与转移淋巴结中P-糖蛋白(p-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白-1(multidrug resistance associated protein-1,MRP-1)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(glutathione-S-transferase-π,GST-π)、胸苷酸合酶(thymidylatesynthase,TS)的表达;采用mtt法检测5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-fu)、长春新碱(vincristine,VCR)、紫杉醇(paclitaxel,PTX)、奥沙利铂(OXAliplatin,OXA)影响胃癌原发灶与转移淋巴结细胞体外抑制情况;分析Pokemon和肿瘤耐药相关因子以及Pokemon和化疗药敏性之间联系。全部数据使用SPSS 19.0软件解析,P0.05具统计学意义。结果:1 胃癌及转移淋巴结中Pokemon的表达免疫组织化学结果显示,Pokemon蛋白在胃癌原发灶和转移淋巴结高表达率分别是65%、70%,此差别无显著性(P0.05)。相关性分析表明,Pokemon蛋白于胃癌原发灶与淋巴结两部位间表达无明显相关性(r=-0.128,P0.05)。荧光定量pcr结果显示胃癌原发灶和转移淋巴结里Pokemon mRNA相对表达量分别是0.196±0.375、0.098±0.071,经wilcoxon符号秩检验,差异无统计学意义(Z=-0.282,P=0.778)。经相关分析,Pokemonmrna表达于胃癌原发灶和转移淋巴结两部位间没有明显相关关系(r=0.077,P=0.637)。2 胃癌及转移淋巴结中P-gp、MRP-1、GST-π、TS蛋白的表达免疫组化结果表明,P-gp、MRP-1和TS蛋白在转移淋巴结表达显著高于胃癌原发灶(82.5%vs57.5%,75%vs55%,72.5%vs52.5%,均P0.05);转移淋巴结、原发灶gst-π蛋白表达强度没有显著区别(72.5%vs65%,P0.05)。相关分析表明P-gp、MRP-1于胃癌原发灶、转移淋巴结两部位间表达分别具有正相关关系(r=0.332,r=0.427,均P0.05)。3 胃癌及转移淋巴结中Pokemon与P-gp、MRP-1、gst-π、TS的相关性经相关性检测,在胃癌组织,Pokemon分别同P-gp、MRP-1、TS的表达呈现正相关性(r=0.399,r=0.428,r=0.508,均p0.05);在转移淋巴结,Pokemon与P-gp、MRP-1之间的表达均具有正相关性(r=0.325,r=0.326,均p0.05)。4 胃癌及转移淋巴结细胞对5-fu、VCR、PTX、OXA化疗药物敏感性比较VCR、OXA作用转移淋巴结细胞的抑制率显著小于原发灶(t=2.056,t=2.481,均P0.05),5-fu、PTX作用于这两种细胞时抑制率无显著差异(P0.05)。5 胃癌及转移淋巴结细胞中Pokemon表达与化疗药敏性关系在原发灶中,VCR、PTX作用Pokemon高表达组肿瘤细胞时抑制率显著小于低表达组(t=2.417,t=3.281,均P0.05);而转移淋巴结,5-Fu、VCR、OXA作用Pokemon高表达组肿瘤细胞时抑制率显著小于低表达组(t=2.071,t=2.220,t=2.558,均P0.05)。结论:1 Pokemon于胃癌原发灶与转移淋巴结都存在较高阳性表达率,启示Pokemon可能参与了胃癌侵袭转移,可以作为基因治疗的靶点;Pokemon于胃癌原发灶与转移淋巴结的表达间没有相关关系,提示Pokemon在胃癌原发灶与转移淋巴结发挥的作用不同,无明显规律性。2 P-gp、MRP-1、GST-π、TS于胃癌癌组织与转移淋巴结都存在较高的高表达率,提示与胃癌原发性耐药形成存在某种联系;P-gp、MRP-1和TS蛋白在转移淋巴结的表达比原发灶高,表明胃癌原发灶和转移淋巴结存在耐药性差别,转移淋巴结可能更具耐药性。3在胃癌原发灶和转移淋巴结,Pokemon分别与P-gp、MRP-1表达间存在正相关关系,提示Pokemon通过某种机制可以调控P-gp、MRP-1表达,参与了胃癌原发性多药耐药;Pokemon与TS的表达在胃癌原发灶具有正相关性而在淋巴结无相关性,提示Pokemon可能参与了对TS的调控,但出现了异质性改变。4 Pokemon表达仅影响部分化疗药物的敏感程度,提示胃癌多药耐药是多因素网络化作用结果。
【关键词】：胃癌 转移淋巴结 Pokemon 多药耐药相关因子 化疗药敏性
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-12
• 材料与方法12-19
• 结果19-21
• 附图21-27
• 附表27-30
• 讨论30-35
• 结论35-36
• 参考文献36-39
• 综述 Pokemon与恶性肿瘤的关系39-58
• 参考文献53-58
• 致谢58-59
• 个人简历59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 马莉;柴大敏;李红伟;冯振中;张琼;陶仪声;;Pokemon和MDM2在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2015年03期

2 霍华;陈红星;王萍;;Pokemon在胃癌组织中的表达及其临床意义[J];上海交通大学学报(医学版);2015年03期

3 梁紫积;刘磊;柳建军;;E2F3对肿瘤细胞增殖调节作用的研究进展[J];中国癌症防治杂志;2015年01期

4 Wanqing Chen;Rongshou Zheng;Hongmei Zeng;Siwei Zhang;Jie He;;Annual report on status of cancer in China, 2011[J];Chinese Journal of Cancer Research;2015年01期

5 陈万青;郑荣寿;曾红梅;邹小农;张思维;赫捷;;2011年中国恶性肿瘤发病和死亡分析[J];中国肿瘤;2015年01期

6 郭蕾;周瑾;;p14~(ARF)在宫颈癌病变中的研究进展[J];现代肿瘤医学;2014年11期

7 陈永林;杨兰生;席大力;唐发兵;;Pokemon在胃癌及癌旁粘膜组织中的表达和临床意义[J];甘肃科技;2014年13期

8 张纪妍;隋丽华;陈杰;贾长茹;;Pokemon在卵巢癌中的表达及临床意义[J];临床肿瘤学杂志;2014年02期

9 牛道立;李建锋;何芬;邹俊涛;周琼芳;魏璇;李杨;陈龙华;;siRNA干扰Pokemon基因对鼻咽癌CNE-2细胞生长作用的研究[J];中华肿瘤防治杂志;2012年14期

10 李勇;檀碧波;韩杰;范立侨;赵群;宋振川;王冬;;胃癌转移淋巴结奥沙利铂体外化疗药敏性与多种耐药相关因子表达的关系[J];中国肿瘤临床;2009年23期

  本文关键词：胃癌及转移淋巴结中Pokemon表达与肿瘤耐药关系的研究，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：335432