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细胞因子诱导杀伤细胞联合p38抑制剂对食管癌细胞EC109的作用研究

发布时间:2017-04-30 05:02

  本文关键词:细胞因子诱导杀伤细胞联合p38抑制剂对食管癌细胞EC109的作用研究,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:背景食管癌是人类常见的恶性肿瘤。中国是食管癌高发国家,同时也是食管癌病死率最高的国家。食管癌致死率在我国位居第四位。食管癌一般发病隐匿,虽然对恶性肿瘤的早期诊断和早期治疗已有很大的进展,但食管癌患者的预后仍然较差,85%以上的病人由于在诊断时已是中晚期,2年生存率不超过15%。细胞因子诱导杀伤(cytokine induced killer,CIK)细胞是最重要的过继性细胞免疫治疗手段之一,其对全身肿瘤细胞的清除作用及潜在的放射增敏效应日益受到关注。体内外研究表明,CIK细胞对食管癌有较好的抑制增殖作用。有研究发现,p38丝裂原活化激酶(38k Da mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路在细胞凋亡过程中起重要调控作用。P38抑制剂能够抑制食管癌细胞的增殖,而最近研究表明,p38抑制剂能够延长T细胞寿命,增强其活性。因此,基于p38抑制剂这种双重的生物学功能,其研究观察CIK细胞联合p38抑制剂对食管癌细胞的治疗效果,为提高CIK的临床治疗效果提供实验依据。目的探讨CIK细胞联合p38抑制剂对食管癌细胞EC109的作用,并初步探讨其分子机制,为CIK联合p38抑制剂治疗食管癌提供理论依据。方法常规分离健康人外周血单个核细胞并诱导为CIK细胞,流式细胞术检测其免疫表型;将实验细胞分为空白对照组(不做处理)、p38抑制剂组(加入p38抑制剂)、CIK组(加入培养14d的CIK细胞)、联合组(加入p38抑制剂联合培养14d的CIK细胞),乳酸脱氢酶释放法检测各组食管癌细胞EC109的存活率;流式细胞术检测各组食管癌细胞EC109的周期阻滞率和凋亡率;Western blot检测p38,p-p38、FAS、OX40蛋白的表达。结果1.空白对照组、p38抑制剂组、CIK组及联合组EC109细胞存活率分别为100.0%、75.0%、50.0%、25.0%,后三组EC109细胞存活率均显著低于空白组(P0.05),联合组显著低于p38抑制剂组和CIK组(P0.05);2.四组食管癌细胞G1期的阻滞率分别为31.46%、42.04%、50.16%、72.02%,后三组EC109细胞对G1期的阻滞率均显著高于空白组(P0.05),联合组显著高于p38抑制剂组和CIK组(P0.05);3.四组食管癌EC109细胞凋亡率分别为7.15%、19.31%、42.15%及67.17%。后三组EC109细胞细胞凋亡率均显著高于空白组(P0.05),联合组显著高于p38抑制剂组和CIK组(P0.05);4.FAS、OX40在p38抑制剂组、CIK组、联合组中表达升高(P0.05)。结论CIK联合p38抑制剂对食管癌细胞EC109具有较强的杀伤作用。
【关键词】:食管癌 细胞因子诱导的杀伤细胞 p38抑制剂 流式细胞术 Western Blot
【学位授予单位】:新乡医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R735.1
【目录】:
  • 摘要5-7
  • Abstract7-10
  • 前言10-12
  • 1 材料与方法12-20
  • 2 结果20-21
  • 3 讨论21-22
  • 4 小结22-23
  • 5 问题与展望23-24
  • 附图24-26
  • 参考文献26-29
  • 综述:细胞因子诱导杀伤细胞和肿瘤的相关性分析29-53
  • 参考文献43-53
  • 附录53-54
  • 攻读学位期间发表文章情况54-55
  • 致谢55-56
  • 个人简历56

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