二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体抑制人肺癌细胞生长的作用研究

发布时间：2017-05-04 16:03

  本文关键词：二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体抑制人肺癌细胞生长的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究二硫键稳定的人源性抗b FGF双链抗体(ds-Diabody)对人肺癌A549细胞的体内外增殖抑制作用。方法利用镍离子亲和层析和离子交换层析的方法纯化得到ds-Diabody,间接ELISA检测其抗原结合活性,CCK-8法检测ds-Diabody对人肺癌A549细胞的增殖抑制作用,Western blot分析其作用于肿瘤细胞的机制,Transwell检测其对肿瘤细胞迁移侵袭的影响。建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录各处理组裸鼠皮下移植瘤的体积及裸鼠体质量变化。免疫组化法检测肿瘤组织CD31和LYVE1的表达情况,初步探讨抗b FGF的人源性ds-Diabody抗体的抗肿瘤机制。结果成功纯化得到具有抗原结合活性的ds-Diabody。CCK-8结果显示,纯化的ds-Diabody可剂量依赖性地抑制人肺癌A549细胞株的增殖。Western blot结果表明ds-Diabody能有效阻断与b FGF相关的MAPK和Akt通路。Transwell结果表明ds-Diabody可以显著抑制A549细胞的迁移及侵袭。裸鼠体内试验中,ds-Diabody抗体显著地抑制了肿瘤的生长,抑制率为86.54%。免疫组化的结果显示ds-Diabody抗体处理组肿瘤组织中微血管密度和淋巴管密度均有下降。结论抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体可有效地抑制人肺癌A549细胞的生长。
【作者单位】： 暨南大学生命科学技术学院生物医学转化研究院广东省分子免疫与抗体工程重点实验室;
【关键词】： 碱性成纤维细胞生长因子 二硫键稳定的双链抗体 人肺癌细胞 血管新生 淋巴管新生
【基金】：国家自然科学基金(81372281) 广东省科技计划项目(2015B020211009) 深圳科技计划(JCYJ20140416085544636)
【分类号】：R734.2
【正文快照】： 肿瘤血管新生对肿瘤的发生、发展和转移起着重要的作用。在众多的血管新生因子中,碱性成纤维细胞生长因子(b FGF,FGF-2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)是最重要的血管新生因子。b FGF在多种恶性肿瘤中均有高表达,b FGF与其受体FGFR结合后诱导Erk和Akt信号通路的活化,进而诱导肿

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