数字PCR较荧光定量PCR可更敏感监测慢性粒细胞白血病患者BCR/ABL（P210）微小残留病及疾病进展

发布时间：2022-01-07 13:13

　　目的:慢性粒细胞白血病（Chronic myeloid leukemia,CML）通过酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinases inhibition,TKI）的规范治疗已使其疗效取得了空前的提升。对CML患者BCR/ABL（P210）表达量的定期监测是保证疗效的前提,目前临床上广泛采用的荧光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR）技术对此监测有检测敏感度、内参基因影响等方面的局限性。微滴式数字PCR（Droplet Digital PCR,dd-PCR）技术是一种检测敏感度更高,可实现目的基因绝对定量的一种新方法。本研究旨在建立一种dd-PCR检测CML患者BCR/ABL（P210）微小残留病的方法,实现对肿瘤负荷更深层次的监测,判断疗效,指导临床个体化治疗。方法:1.在细胞水平,用dd-PCR和RT-qPCR同时检测K562细胞与正常人单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cell,PBMC）依次梯度稀释的细胞悬液,明确两种方法的检测极限以及两者结果的相关性。2.在患者外周血水... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

K562细胞与PBMC梯度稀释细胞悬液RT-qPCR结果

图 2-2 梯度稀释细胞悬液 dd-PCR 结果:A02-A08 依次为 1:1，1:10，1:102，1:103,1:104，1:105，1:106细胞悬液结果；A01 为阳性对照，A09 为阴性对照结果（A 图中蓝色微滴为阳性微滴，灰色微滴则为阴性微滴；C 图中蓝色柱状图代表阳性微滴数，绿色柱状图代表生成的总微滴数）。11

山西医科大学硕士学位论文 dd-PCR 与 RT-qPCR 结果的相关性与转换方程的临床验证.1 dd-PCR 与 RT-qPCR 结果的相关性通过用两种方法对细胞悬液检测结果分析，得到如表 2-1 的结果，其中 dd-RT-qPCR 的最终结果用均数±标准差表示，经相关性分析得两种方法结果的R2≥0.99。对 dd-PCR 和 RT-qPCR 的结果进行回归分析，可得两种结果之间相方程：Y=33.148X1.222（Y：dd-PCR 结果；X：RT-qPCR 结果）（图 2-3）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]酪氨酸激酶抑制剂选择的困惑[J]. 朱焕玲.  临床血液学杂志. 2017(02)
[2]100例慢性粒细胞白血病染色体核型分析[J]. 王东旭,王喆,王艳.  四川生理科学杂志. 2017(02)
[3]数字PCR与荧光PCR方法鉴别餐厨废弃植物油的比较[J]. 杨冬燕,杨永存,李浩,刘燕飞,邓平建.  中国卫生检验杂志. 2015(19)
[4]BCR-ABL融合基因检测方法的进展[J]. 王春霞,温柏平.  医学综述. 2013(01)



本文编号：3574610