神经鞘磷脂合成酶2（SGMS2）通过TGF-β/Smad信号通路促进乳腺癌转移的机制研究
发布时间：2022-01-15 10:51
研究背景与目的乳腺癌是全球范围内女性最常见的恶性肿瘤,是女性癌症死亡的主要原因之一,严重影响女性身心健康。乳腺癌的治疗包括手术、化疗、放疗等有效的综合治疗方案,但乳腺癌存在一定的复发转移风险,肿瘤转移是乳腺癌患者死亡的最重要原因。目前肿瘤转移机制并未完全阐明,因此进一步深入探讨乳腺癌转移相关机制具有重要意义。神经鞘磷脂合成酶2（sphingomyelin synthase 2,SGMS2）定位于细胞膜,以神经酰胺（Ceramide,Cer）和卵磷脂为底物,催化形成甘油二酯和神经鞘磷脂（sphingomyelin,SM）。Cer和SM均是细胞重要的脂质成分,相关研究显示其与恶性肿瘤发生密切相关。但SGMS2作为维持细胞内Cer和SM稳态的关键酶,目前关于该酶在肿瘤发生发展中的作用缺少明确详细的报道,对于SGMS2是否参与乳腺癌转移以及相关的分子机制更是知之甚少。我们的前期研究发现SGMS2通过Cer相关通路抑制乳腺癌细胞凋亡,促进细胞增殖。因此,本课题拟从细胞脂质代谢的角度,探讨SGMS2与乳腺癌转移的相关性,并进一步阐明相关的分子机制,为乳腺癌转移的研究及治疗提供新的科学依据。研究方法...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１乳腺癌组织和配对的癌旁组织的ＳＧＭＳ２?ｍＲＮＡ水平??－－
?第二章?ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响???来水流动冲洗３ｍｉｎ；??５）苏木素染色胞核ｌ－５ｍｍ，１％盐酸酒精分化３ｓ，自来水流动冲洗返蓝??２０ｍｉｎ，?１％伊红染色胞质３ｍｉｎ；??６）切片依次按照“２ｍｉｎ７０％乙醇，２ｍｉｎ８０％乙醇，２ｍｉｎ９０％乙醇，２ｍｉｎ无??水乙醇Ｉ，２ｍｉｎ无水乙醇ＩＩ，?５ｍｉｎ二甲苯Ｉ，５ｍｉｎ二甲苯丨１，”进行梯度脱水；??７）置于通风处自然晾干后中性树胶封片，显微镜下观察。??３．统计数据分析??同第一章“材料与方法”?３．统计数据分析部分所述??二、实验结果??１．瞬时过表达和干扰乳腺癌细胞ＳＧＭＳ２的表达??为了进一步研宄ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞的生物学行为影响，我们分别使用过??表达ＳＧＭＳ２－０ＲＦ构建体、ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ以及相应的对照物转染ＭＣＦ－７和??ＭＤＡ－ＭＢ－２３１细胞，并通过ＲＴ－ＰＣＲ技术验证转染效率。结果表明均成功地上??调（图２－１－Ａ）和下调（图２－１－Ｂ）两种癌细胞的ＳＧＭＳ２表达，为我们下一■步的??实验操作奠定基矗??Ａ?Ｂ??｜?Ｃｏｎｔｒｏｌ?１５ｌ?ＭＣＦ７?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??２４０｜｜ｓｇｍｓ２?＊＊?１５??！１４０?＿?！１０?ｉ?＊＊：?■＊＊＊，??ＬｌｍＩ?Ｍｍ??图２－１?ＳＧＭＳ２－０ＲＦ构建体过表达和ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ干扰的效率??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ?ＳＧＭＳ２?ＯＲＦ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ?ａｎｄ?ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ．??＊Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?＊＊Ｐ?＜?０．０１?ｖｓ．?Ｃｏｎｔｒｏｌ??２４??
?第二章?ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞＾侵袭和转移能力的影响???Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－４??卜界闕ｐｐｆｅ??ｕ－?；－Ｃｒ?，■■：％?：＾．?＇?Ｖ，：?；４?？＊．?ｇ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??１?／－１?；?２５〇ｌＩ＾Ａ．１??？ｄ?？：?．?＝?■ｓｉＲＮＡ＇４??ｆ?■＊＊?＊＊?ＩＩＩ??１００ｐｍ??图２－３－Ｂ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ迁移实验检测过表达ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞迁移能力的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３－Ｂ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｔｈｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｂｉｌｉｔｙ?ｉｎ?ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ?ｗｉｔｈ??ＳＧＭＳ２?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｄ．＊Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?＊＊Ｐ＜?０．０１?ｖｓ．?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－４??．？??？?？，厂？?一?：：?？?．ｗ?，、．??ｔ?Ｖ４．?：?：?：??＾?＾?Ｉ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??５?ｇ！?５〇１｜?ｓｉＲＮＡ－１??？?？？?＾?Ｉ?ｓｉＲＮＡ－４??＾?，?，?，．．．?，，?，?）ｒ＾?ｇ＿ｌ?广…■??５１００?■?★★??ｓ?ｉ?■＊＊?咖??ｍ?２?５０?＊?■?｜??＾?．．．ｖ?■?！??ｉｈ＾：＞：－ｄｆ?？?＂－ｄｌ?，??１００ｐｍ?＾??图２－３－Ｃ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验检测过表达ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞侵袭能力的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３－Ｃ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｉｎｖａｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｔ
【参考文献】：
期刊论文
[1]神经鞘磷脂合成酶SMS1和SMS2在人乳腺癌组织中的表达及与病理的相关性[J]. 潘云青. 临床医学研究与实践. 2019(32)
[2]神经鞘磷脂合成酶2基因沉默对乳腺癌细胞凋亡的影响[J]. 杭月,林昌岫,黄成日. 实用医学杂志. 2019(08)
本文编号：3590487
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１乳腺癌组织和配对的癌旁组织的ＳＧＭＳ２?ｍＲＮＡ水平??－－
?第二章?ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞侵袭和转移能力的影响???来水流动冲洗３ｍｉｎ；??５）苏木素染色胞核ｌ－５ｍｍ，１％盐酸酒精分化３ｓ，自来水流动冲洗返蓝??２０ｍｉｎ，?１％伊红染色胞质３ｍｉｎ；??６）切片依次按照“２ｍｉｎ７０％乙醇，２ｍｉｎ８０％乙醇，２ｍｉｎ９０％乙醇，２ｍｉｎ无??水乙醇Ｉ，２ｍｉｎ无水乙醇ＩＩ，?５ｍｉｎ二甲苯Ｉ，５ｍｉｎ二甲苯丨１，”进行梯度脱水；??７）置于通风处自然晾干后中性树胶封片，显微镜下观察。??３．统计数据分析??同第一章“材料与方法”?３．统计数据分析部分所述??二、实验结果??１．瞬时过表达和干扰乳腺癌细胞ＳＧＭＳ２的表达??为了进一步研宄ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞的生物学行为影响，我们分别使用过??表达ＳＧＭＳ２－０ＲＦ构建体、ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ以及相应的对照物转染ＭＣＦ－７和??ＭＤＡ－ＭＢ－２３１细胞，并通过ＲＴ－ＰＣＲ技术验证转染效率。结果表明均成功地上??调（图２－１－Ａ）和下调（图２－１－Ｂ）两种癌细胞的ＳＧＭＳ２表达，为我们下一■步的??实验操作奠定基矗??Ａ?Ｂ??｜?Ｃｏｎｔｒｏｌ?１５ｌ?ＭＣＦ７?ＭＤＡ－ＭＢ－２３１??２４０｜｜ｓｇｍｓ２?＊＊?１５??！１４０?＿?！１０?ｉ?＊＊：?■＊＊＊，??ＬｌｍＩ?Ｍｍ??图２－１?ＳＧＭＳ２－０ＲＦ构建体过表达和ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ干扰的效率??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｔｈｅ?ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｏｆ?ＳＧＭＳ２?ＯＲＦ?ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ?ａｎｄ?ＳＧＭＳ２?ｓｉＲＮＡ．??＊Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?＊＊Ｐ?＜?０．０１?ｖｓ．?Ｃｏｎｔｒｏｌ??２４??
?第二章?ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞＾侵袭和转移能力的影响???Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－４??卜界闕ｐｐｆｅ??ｕ－?；－Ｃｒ?，■■：％?：＾．?＇?Ｖ，：?；４?？＊．?ｇ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??１?／－１?；?２５〇ｌＩ＾Ａ．１??？ｄ?？：?．?＝?■ｓｉＲＮＡ＇４??ｆ?■＊＊?＊＊?ＩＩＩ??１００ｐｍ??图２－３－Ｂ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ迁移实验检测过表达ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞迁移能力的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３－Ｂ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｔｈｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ａｂｉｌｉｔｙ?ｉｎ?ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｃｅｌｌｓ?ｗｉｔｈ??ＳＧＭＳ２?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｄ．＊Ｐ＜?０．０５?ａｎｄ?＊＊Ｐ＜?０．０１?ｖｓ．?Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｓｉＲＮＡ－１?ｓｉＲＮＡ－４??．？??？?？，厂？?一?：：?？?．ｗ?，、．??ｔ?Ｖ４．?：?：?：??＾?＾?Ｉ?Ｃｏｎｔｒｏｌ??５?ｇ！?５〇１｜?ｓｉＲＮＡ－１??？?？？?＾?Ｉ?ｓｉＲＮＡ－４??＾?，?，?，．．．?，，?，?）ｒ＾?ｇ＿ｌ?广…■??５１００?■?★★??ｓ?ｉ?■＊＊?咖??ｍ?２?５０?＊?■?｜??＾?．．．ｖ?■?！??ｉｈ＾：＞：－ｄｆ?？?＂－ｄｌ?，??１００ｐｍ?＾??图２－３－Ｃ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验检测过表达ＳＧＭＳ２对乳腺癌细胞侵袭能力的影响??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３－Ｃ?Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ?ｉｎｖａｓｉｏｎ?ａｓｓａｙ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｔ
【参考文献】：
期刊论文
[1]神经鞘磷脂合成酶SMS1和SMS2在人乳腺癌组织中的表达及与病理的相关性[J]. 潘云青. 临床医学研究与实践. 2019(32)
[2]神经鞘磷脂合成酶2基因沉默对乳腺癌细胞凋亡的影响[J]. 杭月,林昌岫,黄成日. 实用医学杂志. 2019(08)
本文编号：3590487
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3590487.html
最近更新
教材专著
