Jaspine B衍生物M-2在胃癌中诱导自噬和程序性坏死的机制研究
发布时间：2022-01-17 19:29
胃癌是癌症死亡的第三大主因,其因缺乏特异的生物性标志所以早期检出率较低,且预后较差,丞待发现新的化疗药物。Jaspine B是从海洋海绵Jaspis和Pachastrissa sp中发现的一种天然鞘脂类分子,具有显著的生物学活性,因此Jaspine B及其衍生物的研究成为热门靶点。本课题中,我们探讨了 Jaspine B衍生物M-2对胃癌细胞的抗肿瘤作用及其分子机制,主要结论如下:（1）用 MTT 法检测了 M-2 对胃癌细胞（MGC803、HGC27、SGC7901）和胃上皮正常细胞（GES1）的抗增殖作用。结果表明,M-2抑制胃癌细胞（MGC803、HGC27、SGC7901）的增殖且对胃上皮正常细胞（GES1）基本无毒性。（2）为了确定M-2诱导胃癌细胞死亡的机制,我们采用了流式细胞仪通过Annexin V-FITC/PI双染法收集细胞,发现死亡细胞主要集中在区域Annexin V-FITC+/PI+内。然后用MTT法检测Caspases抑制剂Z-VAD-fmk与M-2联用的结果,发现与凋亡阳性对照shikonin相比,Z-VAD-fmk未能逆转M-2引起的死亡率。最后用Hoec...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图４?Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３细胞的克隆形成
?Ｉ．”??ｗ＇．?＾：；ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｍ－２??图４?Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３细胞的克隆形成。??小结：Ｍ－２显著抑制了胃癌细胞（ＭＧＣ８０３）的克隆形成。??３．?３?Ｍ－２诱导胃癌细胞（ＭＧＣ８０３）非凋亡性死亡??３．?３．?１双染法检测Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞的抑制作用??采用Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法通过流式细胞仪检测Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞??的抑制作用。Ｍ－２浓度设置为０、１、２、４和８＾Ｍ，作用于ＭＧＣ８０３细胞的时间??为２４ｈ。从图５可以得出，Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞有很强的促死亡作用。ＭＧＣ８０３??细胞在浓度１、２、４和８ｐＭ作用２４ｈ后，细胞的死亡率分别增加了?４．４％、１３．７％、??２６．７％和?６５．１％。??０?１?２?４?８?（＾Ｍ）??Ｓｐｅｏｗｅｎ?００１－０?Ｓｐｅｃｍｖｅｎ?００１－１??Ｓｐｅｃｉｍｅｎ?〇ｐｉ－２??Ｓｆｒｅｏｍｅｎ?００１?＾?ＳＢ？ｏｍ？ｎ?００１－８??－ｊ￣￣?２ｃＴｊ?－ｊ￣￣Ｉ￣＾７］?－ｄ?￣￣＂＂＂＂??ｓ＾??ＰＩ?９７＆，＞＼?〇〇５ｂ｜?９３％?ＣＣＳ?３?Ｃ３Ｓ｜??ｉｉ－ｉｉ?：?！?ｔｒ：！？?ｒ?ｉ?ｒ－ｒｒｒ＾?■?ｉＪｒｔ＾?■?ＭＴｒ！ｒ＿?；■?ｉ?■?ｍｉｉＴ－?ｉ?＂■?Ｍ?ｉ?＇ｉ１．?■?ｍ?！ｉ?ｉ１?＞?ｎｎ＾?ｉ?Ｍｉｎｉ?ｉ＇ｎ？?ｉ?－？??１８?■ＶｆｆｏＶ。’?１１）１?｜?一?＇。１?｜?ｗ?＆ｍｃ３?ｗ?ｌ０＊?１０?＂＊?尤?ｍｃＳ１?＂??Ａｎｎｅｉｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ??图５?ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法测定Ｍ
?＾???３．?３．?２?Ｃａｓｐａｓｅｓ抑制剂Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ无法逆转Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞的抑??制作用??用ＭＴＴ法检测ｃａｓｐａｓｅｓ抑制剂Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ对Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３细胞存活??率的影响。由图６Ａ可以得出，Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ与Ｍ－２联用后ＭＧＣ８０３细胞存活率??下降６４．４７％，而Ｍ－２单独作用于ＭＧＣ８０３细胞后存活率下降６６．９５％，二者之??间无显著性差异。图６Ｂ中可以得出，Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ与凋亡阳性对照ｓｈｉｋｏｎｉｎ联用??后ＭＧＣ８０３细胞存活率下降４７．２０％，而ｓｈｉｋｏｎｉｎ单独作用于ＭＧＣ８０３细胞后存??活率下降７１．７５％，二者之间有显著性差异。??／＼?１２０１?ＮＳ?ｇ?１２０－Ｉ?＊＊＊??ｒ：ｉ?ｎｒ??ｉ?Ｉ?：＼ｍ?＞?ＩＪ．??Ｍ－２（８?ｐＭ）?■?＋?－?＋?ｓｈｉｋｏｎｉｎ（４?ｐＭ）?－?＋?？?＋??Ｚ－ＶＡＤ－ｆｉｎｋ（１００ｕＭ）?？?－?＋?＋?Ｚ－ＶＡＤ－ｆｉｎｋ（１００＾Ｍ）?－?－?＋?－??图６?ＭＴＴ法测定Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ对Ｍ－２和ｓｈｉｋｏｎｉｎｓ引起的ＭＧＣ８０３细胞存活率的影响。??（Ａ）ＭＴＴ法测定Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ对Ｍ－２引起的ＭＧＣ８０３细胞存活率的影响。（Ｂ）?ＭＴＴ法测定??Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ对ｓｈｉｋｏｎｉｎ引起的ＭＧＣ８０３细胞存活率的影响。??３．?３．?３?Ｈｏｅｃｈｓｔ染色检测Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞核形态的影响??采用Ｈｏｅｃｈｓｔ染色通过荧光显微镜检测Ｍ－２作用ＭＧＣ８０３细胞后细胞核形??态的变化。Ｍ－２浓度设置为０、１、２、４和８ｐＭ，作用时间为２４ｈ。由图７
【参考文献】：
期刊论文
[1]Impact of environmental factors on gastric cancer:A review of the scientific evidence,human prevention and adaptation[J]. Jie Yin,Xiaoxu Wu,Suping Li,Chenlu Li,Zhiyi Guo. Journal of Environmental Sciences. 2020(03)
本文编号：3595308
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图４?Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３细胞的克隆形成
?Ｉ．”??ｗ＇．?＾：；ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｍ－２??图４?Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３细胞的克隆形成。??小结：Ｍ－２显著抑制了胃癌细胞（ＭＧＣ８０３）的克隆形成。??３．?３?Ｍ－２诱导胃癌细胞（ＭＧＣ８０３）非凋亡性死亡??３．?３．?１双染法检测Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞的抑制作用??采用Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法通过流式细胞仪检测Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞??的抑制作用。Ｍ－２浓度设置为０、１、２、４和８＾Ｍ，作用于ＭＧＣ８０３细胞的时间??为２４ｈ。从图５可以得出，Ｍ－２对ＭＧＣ８０３细胞有很强的促死亡作用。ＭＧＣ８０３??细胞在浓度１、２、４和８ｐＭ作用２４ｈ后，细胞的死亡率分别增加了?４．４％、１３．７％、??２６．７％和?６５．１％。??０?１?２?４?８?（＾Ｍ）??Ｓｐｅｏｗｅｎ?００１－０?Ｓｐｅｃｍｖｅｎ?００１－１??Ｓｐｅｃｉｍｅｎ?〇ｐｉ－２??Ｓｆｒｅｏｍｅｎ?００１?＾?ＳＢ？ｏｍ？ｎ?００１－８??－ｊ￣￣?２ｃＴｊ?－ｊ￣￣Ｉ￣＾７］?－ｄ?￣￣＂＂＂＂??ｓ＾??ＰＩ?９７＆，＞＼?〇〇５ｂ｜?９３％?ＣＣＳ?３?Ｃ３Ｓ｜??ｉｉ－ｉｉ?：?！?ｔｒ：！？?ｒ?ｉ?ｒ－ｒｒｒ＾?■?ｉＪｒｔ＾?■?ＭＴｒ！ｒ＿?；■?ｉ?■?ｍｉｉＴ－?ｉ?＂■?Ｍ?ｉ?＇ｉ１．?■?ｍ?！ｉ?ｉ１?＞?ｎｎ＾?ｉ?Ｍｉｎｉ?ｉ＇ｎ？?ｉ?－？??１８?■ＶｆｆｏＶ。’?１１）１?｜?一?＇。１?｜?ｗ?＆ｍｃ３?ｗ?ｌ０＊?１０?＂＊?尤?ｍｃＳ１?＂??Ａｎｎｅｉｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ??图５?ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ双染法测定Ｍ
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Impact of environmental factors on gastric cancer:A review of the scientific evidence,human prevention and adaptation[J]. Jie Yin,Xiaoxu Wu,Suping Li,Chenlu Li,Zhiyi Guo. Journal of Environmental Sciences. 2020(03)
本文编号：3595308
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