NTS/IL-8通路调控肝细胞肝癌上皮间质转化的分子机制研究
发布时间：2023-01-08 13:29
目的:探讨肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）中神经降压素/白介素8（neurotensin,NTS/interleukin-8,IL-8）信号通路的具体分子机制及其与HCC侵袭性和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的关系。方法:随机选取100例经部分肝切除术治疗的HCC患者石蜡组织切片标本,同时收集患者的临床病理资料。利用免疫组织化学方法分别检测NTS、神经降压素受体1（neurotensin receptor 1,NTR1）、IL-8、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、基质金属蛋白9（matrixmetalloproteinase-9,MMP-9）、分化抗原群68（cluster of differentiation 68,CD68）、CD163、CD31等炎性反应指标,Ecadherin、β-catenin等EMT指标的表达。分析NTS/IL-8通路活化与HCC临床病理指标的相关性。细胞学实验选取了高表达NTS低表达NTR1的...
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
一、HCC组织中NTS/IL-8 的异常活化及临床意义
1.1 对象和方法
1.1.1 病例来源
1.1.2 标本来源
1.1.3 免疫组织化学染色试剂
1.1.4 免疫组织化学染色
1.1.5 统计学处理
1.2 结果
1.2.1 HCC组织中NTS/IL-8 通路异常活化的表达情况
1.2.2 NTS/ IL-8 异常表达与HCC患者临床病理指标的相关性
1.2.3 NTS/IL-8 异常活化与HCC组织局部炎症的相关性
1.2.4 NTS/IL-8 异常活化与HCC组织EMT的相关性
1.3 讨论
1.4 小结
二、HCC细胞系中NTS/ IL-8 通路异常激活对EMT的影响
2.1 对象和方法
2.1.1 细胞系
2.1.2 细胞培养试剂
2.1.3 小干扰RNA转染试剂
2.1.4 细胞功能实验试剂
2.1.5 荧光实时定量PCR实验试剂
2.1.6 Western Blot实验试剂
2.1.7 ELISA实验试剂
2.1.8 siRNA转染
2.1.9 PCR反应
2.1.10 Wound healing实验
2.1.11 Transwell侵袭实验
2.1.12 Western Blot
2.1.13 ELISA
2.2 结果
2.2.1 细胞系的构建及验证
2.2.2 外源性NTS和高表达NTR1刺激HCC细胞分泌IL-8
2.2.3 阻断IL-8 受体后对NTS诱导HCC细胞侵袭性的影响
2.2.4 阻断IL-8 受体后对NTS诱导HCC细胞EMT的影响
2.3 讨论
2.4 小结
三、NTS/ IL-8 通路调控HCC细胞EMT的机制
3.1 对象和方法
3.1.1 细胞系
3.1.2 细胞培养试剂
3.1.3 细胞转导信号通路阻断剂
3.1.4 Western Blot实验试剂
3.1.5 核ELISA
3.1.6 Annexin V凋亡实验
3.1.7 细胞信号阻断实验
3.2 结果
3.2.1 NTS信号刺激HCC细胞MAPK通路激活
3.2.2 NTS信号刺激HCC细胞中NF-κB通路激活
3.2.3 NTS信号不能刺激HCC细胞中PKC和PI3K通路活化
3.2.4 阻断MAPK通路和NF-KB通路后HCC细胞IL-8 分泌显著下降
3.2.5 阻断MAPK通路和NF-KB通路对HCC细胞凋亡的影响
3.2.6 阻断MAPK和NF-KB通路对HCC细胞侵袭性的影响
3.2.7 阻断MAPK和NF-κB通路对HCC细胞EMT的影响
3.3 讨论
3.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 NTS/IL-8 信号通路与恶性肿瘤相关性的研究进展
综述参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3728556
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
一、HCC组织中NTS/IL-8 的异常活化及临床意义
1.1 对象和方法
1.1.1 病例来源
1.1.2 标本来源
1.1.3 免疫组织化学染色试剂
1.1.4 免疫组织化学染色
1.1.5 统计学处理
1.2 结果
1.2.1 HCC组织中NTS/IL-8 通路异常活化的表达情况
1.2.2 NTS/ IL-8 异常表达与HCC患者临床病理指标的相关性
1.2.3 NTS/IL-8 异常活化与HCC组织局部炎症的相关性
1.2.4 NTS/IL-8 异常活化与HCC组织EMT的相关性
1.3 讨论
1.4 小结
二、HCC细胞系中NTS/ IL-8 通路异常激活对EMT的影响
2.1 对象和方法
2.1.1 细胞系
2.1.2 细胞培养试剂
2.1.3 小干扰RNA转染试剂
2.1.4 细胞功能实验试剂
2.1.5 荧光实时定量PCR实验试剂
2.1.6 Western Blot实验试剂
2.1.7 ELISA实验试剂
2.1.8 siRNA转染
2.1.9 PCR反应
2.1.10 Wound healing实验
2.1.11 Transwell侵袭实验
2.1.12 Western Blot
2.1.13 ELISA
2.2 结果
2.2.1 细胞系的构建及验证
2.2.2 外源性NTS和高表达NTR1刺激HCC细胞分泌IL-8
2.2.3 阻断IL-8 受体后对NTS诱导HCC细胞侵袭性的影响
2.2.4 阻断IL-8 受体后对NTS诱导HCC细胞EMT的影响
2.3 讨论
2.4 小结
三、NTS/ IL-8 通路调控HCC细胞EMT的机制
3.1 对象和方法
3.1.1 细胞系
3.1.2 细胞培养试剂
3.1.3 细胞转导信号通路阻断剂
3.1.4 Western Blot实验试剂
3.1.5 核ELISA
3.1.6 Annexin V凋亡实验
3.1.7 细胞信号阻断实验
3.2 结果
3.2.1 NTS信号刺激HCC细胞MAPK通路激活
3.2.2 NTS信号刺激HCC细胞中NF-κB通路激活
3.2.3 NTS信号不能刺激HCC细胞中PKC和PI3K通路活化
3.2.4 阻断MAPK通路和NF-KB通路后HCC细胞IL-8 分泌显著下降
3.2.5 阻断MAPK通路和NF-KB通路对HCC细胞凋亡的影响
3.2.6 阻断MAPK和NF-KB通路对HCC细胞侵袭性的影响
3.2.7 阻断MAPK和NF-κB通路对HCC细胞EMT的影响
3.3 讨论
3.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 NTS/IL-8 信号通路与恶性肿瘤相关性的研究进展
综述参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3728556
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/zlx/3728556.html
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