TBX3蛋白在甲状腺乳头状癌发生发展中的功能及机制研究

发布时间：2024-05-15 20:58

　　目的:甲状腺癌(Thyroid Carcinoma,TC)作为最常见的内分泌系统癌症,在过去的几十年里发病率不断上升。虽然BRAF^V600E突变及RET/PTC染色质重排在TC病例中的作用已比较明确,但是其它遗传学事件还知之甚少,因此,寻找新的分子靶标指导早期诊断和进行靶向治疗具有非常重要的意义。TBX3基因,作为T-box转录因子家族的重要成员,在胚胎发育及癌症发生中具有重要功能,被报道在多种癌症中过量表达,通常扮演癌基因的角色,参与肿瘤发生的多种生物学行为。主要通过抑制p53的激活子p14^ARF或CDK激酶抑制剂p21^WAF1/CIP1,以p53依赖及非依赖的方式促进癌症发生,TBX3在甲状腺乳头状癌中的功能尚未见报道。本课题的主要目的是研究TBX3如何影响甲状腺乳头状癌(PTC)的发生、发展,探讨TBX3在PTC中异常表达存在的可能分子机制。方法:第一部分:研究TBX3在甲状腺乳头状癌临床标本中的表达情况及分析TBX3表达与临床病理特征的相关性。该部分主要从三个方面进行研究。首先,收集98例甲状腺乳头状癌病人组织,...

【文章页数】：118 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、TBX3在PTC临床标本中的表达
    1.1 对象和方法
        1.1.1 甲状腺乳头状癌病理切片、RNA和蛋白
        1.1.2 乳头状甲状腺癌细胞系
        1.1.3 主要试剂
        1.1.4 主要溶液、缓冲液和培养基
        1.1.5 主要仪器和设备
        1.1.6 实验方法及流程
    1.2 结果
        1.2.1 免疫组织化学染色检测TBX3的表达
        1.2.2 PTC组织中mRNA和蛋白水平TBX3的表达情况
        1.2.3 PTC细胞系中检测TBX3的表达情况
        1.2.4 TBX3表达与临床病理特征的相关性分析
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、TBX3蛋白促进PTC细胞增殖
    2.1 对象和方法
        2.1.1 细胞、菌种和质粒
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要溶液、缓冲液与培养基
        2.1.4 主要仪器、设备
        2.1.5 实验方法及流程
    2.2 结果
        2.2.1 应用siRNA瞬时敲低TBX3检测细胞增殖变化
        2.2.2 应用shRNA稳定敲低TBX3检测细胞增殖变化
        2.2.3 慢病毒稳定过表达TBX3检测细胞增殖变化
        2.2.4 应用RNA-seq寻找下游靶基因
        2.2.5 研究p57KIP2水平变化对于TBX3促PTC发生功能的影响
        2.2.6 TBX3促进PTC发生发展的在体作用
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、TBX3蛋白调控p57KIP2表达的具体分子机制研究
    3.1 对象和方法
        3.1.1 细胞、菌种和质粒
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要溶液、缓冲液和培养基
        3.1.4 主要仪器和设备
        3.1.5 实验方法及流程
    3.2 结果
        3.2.1 虫荧光素酶报告质粒的构建
        3.2.2 虫荧光素酶实验检测TBX3蛋白调控CDKN1C的转录活性
        3.2.3 内源性TBX3蛋白与PRC2复合物及HDAC1/2的胞内结合实验
        3.2.4 ChIP实验检测TBX3与CDKN1C启动子结合能力
        3.2.5 DNApulldown实验证明TBX3与p57KIP2启动子处的结合程度
    3.3 讨论
    3.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 转录因子TBX3的结构及功能研究
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3974208