三阴性乳腺癌细胞表面的HER1和c-Met单分子电镜成像研究

发布时间：2024-07-06 01:16

　　三阴性乳腺癌细胞膜表面高表达表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,HER1),肝细胞生长因子受体(c-Met)是目前肿瘤防治研究中重要的药物靶点,但其在肿瘤细胞膜表面的存在形式和分布特点仍未见详细报道。本文利用金纳米颗粒标记HER1、c-Met分子并利用扫描电镜对三阴性乳腺癌细胞膜表面HER1、c-Met分子进行了纳米尺度下的超高分辨成像研究。结果显示在三阴性乳腺癌细胞膜表面HER1以单体、二聚体和多聚体的形式存在,HER1在MB-231细胞表面在常单体比例为37.98%,二聚体比例约为12.22%,多聚体比例为49.80%。c-Met在MB-231细胞表面在常规培养条件下单体比例为39.50%,二聚体比例约为13.44%,多聚体比例为49.06%。在同一个细胞表面c-Met主要分布在细胞的边缘处,内部分布数量远远小于细胞边缘处。MB-231细胞在无血清的环境下培养12小时后成像观察发现无配体诱导的MB-231细胞表面c-Met主要以单体形式存在,其比例为88.00%,二聚体比例为8.00%,多聚体比例为4.00%。在相同的无血清的条件下...

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩写词
第1章 绪论
    1.1 三阴性乳腺癌简介
    1.2 表皮生长因子受体家族与肝细胞生长因子受体
        1.2.1 表皮生长因子受体家族Ⅰ结构与功能
        1.2.2 肝细胞生长因子受体结构与功能
        1.2.3 表皮生长因子受体家族Ⅰ与肝细胞生长因子受体成像研究
    1.3 核酸适配体
        1.3.1 核酸适配体技术简介
        1.3.2 核酸适配体技术的优点
    1.4 电子显微镜简介
        1.4.1 扫描电子显微镜
        1.4.2 扫描电镜-扫描透射模式成像简介
        1.4.3 透射电子显微镜
        1.4.4 电镜液体装置简介
    1.5 内容及意义
第2章 核酸适配体与靶蛋白特异性结合
    2.1 实验仪器
    2.2 实验材料
    2.3 实验方法
        2.3.1 六孔板培养细胞
        2.3.2 提取蛋白
        2.3.3 Weston Blot检测
        2.3.4 免疫荧光检测
    2.4 实验结果
        2.4.1 Weston Blot检测结果
        2.4.2 免疫荧光实验结果
    2.5 本章小结
第3章 三阴性乳腺癌表面HER1和c-Met单分子成像
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验耗材
        3.1.2 溶液配制
    3.2 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 细胞培养
        3.3.2 ITO玻璃处理
        3.3.3 细胞在ITO玻璃上的培养
        3.3.4 MB-231细胞标定金颗粒
        3.3.5 液体池(liquid cell)处理
        3.3.6 细胞培养在liquid cell中
        3.3.7 MB-231标定量子点
    3.4 统计分析
    3.5 实验结果与讨论
        3.5.1 HER1在液体池中成像
        3.5.2 MB-231细胞在SE与BSE模式下成像
        3.5.3 c-Met在细胞膜表面的表达与讨论
        3.5.4 添加配体对c-Met分布聚合状态的影响
    3.6 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间科研成果
致谢



本文编号：4001836