免疫金纳米笼子介导热疗诱导人乳腺癌细胞凋亡的研究

发布时间：2017-06-23 21:04

  本文关键词：免疫金纳米笼子介导热疗诱导人乳腺癌细胞凋亡的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:经过激光照射之后,免疫金纳米笼子可以将光能量转化为热能从而杀死肿瘤细胞。由于免疫金纳米笼子具有上述物理和生物学特性,本实验观察了将Anti-CK19抗体链接到金纳米笼制成的符合材料的细胞毒性,并探讨其对人乳腺癌细胞靶向杀伤效应,我们以MCF-7、MDA-MB-231、MCF-7/TMA三种细胞为例,检测了免疫金纳米笼子对人不同乳腺癌细胞株热疗效果的差异性,并检测热疗后细胞内caspase-9蛋白的表达量,初步探索这种杀伤乳腺癌细胞的可能的信号通路,本实验可能为这种纳米粒子的进一步研究和应用提供相应的理论学基础。方法:免疫组化方法检测验证了MCF-7细胞膜表面表达CK19抗原,我们将Anti-CK19抗体连接到金纳米笼上,制成了具有生物靶向性能的纳米结构。我们将近红外光的功率密度设定为1.5 W/cm2、其波长调至为808 nm,用其照射链接有免疫金纳米笼的细胞,时间为30 min;在荧光显微镜下观察免疫金纳米笼子光热杀伤乳腺癌细胞的效果,我们用AV/PI染色后在流式细胞仪上检测其对上述三种乳腺癌细胞株光热杀伤的效果是否具有差异性,用免疫组化方法检测在不同纳米笼浓度下热疗后乳腺癌细胞内caspase-9蛋白的表达量,通过MTT法探究纳米笼子对MCF-7细胞的浓度-毒性效应。结果:本实验通过免疫组化的方法证实了MCF-7细胞膜富含表达CK19抗原。免疫金纳米笼子通过光热作用可以明显提高温度达到杀伤乳腺癌细胞效果;该光热作用所导致的凋亡率在MCF-7、MCF-7/TAM、MDA-MB-231中无明显差异(F=0.84,P=0.456);在温度为37℃时,caspase-9的表达量较低,在低于43℃时,随着温度的升高caspase-9的表达量明显升高(F=14.914,P=0.000);MTT法显示高剂量免疫金纳米笼子可抑制乳腺癌细胞的增殖(F=5.774,P=0.000),且存在时间-效应(F=42.378,P=0.000)和剂量-效应(F=76.440,P=0.000)关系。结论:(1)本实验证实了人乳腺癌细胞株MCF-7细胞膜表面富含CK19抗原;(2)本实验证实了用上述功率密度和波长的激光照射链接有免疫金纳米笼子的细胞,可以经过光热转化作用杀伤细胞,且对本实验证实功率密度为1.5 W/cm2、波长为808 nm的激光对正常乳腺癌细胞是安全有效的;(3)上调caspase-9的表达是免疫金纳米笼子介导的热疗诱导乳腺癌细胞凋亡的机制之一;(4)免疫金纳米笼介导的热疗效果与细胞的耐药性以及雌激素受体是否阳性均无关。
【关键词】：光热治疗 金纳米笼 乳腺癌 生物毒性 caspase-9
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-13
• 材料和方法13-24
• 结果24-29
• 讨论29-33
• 结论33-34
• 参考文献34-40
• 附录40-42
• 致谢42-43
• 综述43-53
• 参考文献49-53

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本文编号：476280