乙肝病毒X蛋白及其截短体对小鼠胎肝前体细胞增殖的影响

发布时间：2017-06-23 21:11

  本文关键词：乙肝病毒X蛋白及其截短体对小鼠胎肝前体细胞增殖的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景和目的：乙肝病毒X蛋白(HBx)是乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞肝癌(HCC)的发生、发展重要原因。HBx蛋白的羧基末端对维持HBV的复制发挥着重要的作用。同时,HBx能够促进小鼠肝脏前体细胞(HPCs)的增殖及成瘤性,然而,HBx蛋白羧基末端对维持HBx促进小鼠胎肝前体细胞(FHPCs)增殖及恶性潜能是否发挥着必不可少的作用,仍不得而知,本研究将重点阐述HBx蛋白羧基末端对FHPCs增殖的影响。方法：差数离心联合密度梯度离心法筛选肝脏前体细胞,经细胞免疫荧光鉴定肝脏前体细胞中CD133, EPCAM, CD49f及CK19表面标记物的表达。添加DMSO, HGF后,过碘酸雪夫氏染色、细胞免疫荧光、流式细胞术检测肝脏前体细胞向肝细胞和胆管上皮细胞分化。转染HBx蛋白后,PCR检测细胞转染效率,并观察HBx转染后肝脏前体细胞形态学、增殖能力及恶性潜能的差异性。结果：(1)本研究中运用具有双向分化潜能的EPCAM+, CD133+和CD49f+的FHPCs,这些细胞在促进分化的条件下培养能够分化为肝细胞和胆管上皮细胞。(2)相比于单层贴壁生长,成球的FHPCs增殖更为迅速。(3)成球的FHPCs接种于软琼脂中相对于鼠尾胶原上,更能够维持干细胞的外形和特性。(4)HBx蛋白的羧基末端能够促进FHPCs增殖,但是不能够维持肝脏肿瘤干细胞样的球样的特性。结论：这些结果进一步理解HBx诱导的FHPCs恶性潜能,同时将有助于后续HCC的治疗。
【关键词】：乙肝病毒X蛋白 HBx截短突变体 增殖 胎肝前体细胞 分化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-8
• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-12
• 前言12-14
• 第一部分 小鼠胎肝前体细胞的提取、鉴定及培养14-35
• 1. 材料与方法14-26
• 2. 结果26-34
• 3. 讨论34-35
• 第二部分 乙肝病毒X蛋白及其截短体对小鼠胎肝前体细胞增殖的影响35-51
• 1. 材料与方法35-46
• 2. 结果46-49
• 3. 讨论49-51
• 参考文献51-55
• 全文总结55-56
• 文献综述56-65
• 参考文献61-65
• 致谢65-66
• 硕士期间发表的论文66

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本文编号：476343