迷走神经调控对肝癌侵袭转移的影响及其相关机制研究

发布时间：2017-06-23 23:11

  本文关键词：迷走神经调控对肝癌侵袭转移的影响及其相关机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：一、背景在我国肝细胞癌已成为排名第二位的癌症死亡原因。外科手术是肝癌治疗最为有效的手段,但是肝癌患者术后5年内的复发转移率却高达80%,成为肝脏外科面临的首要问题。肝癌的复发转移与肿瘤细胞的迁移、侵袭密切相关。近年来大量的研究证据表明,肿瘤的发生发展与神经调控关系密切。本课题组前期的研究已经证明交感神经过度兴奋可以加重肝脏损伤时发生的炎症反应,进而促进肝癌的发生;另外,副交感神经可以通过“胆碱能抗炎通路”抑制炎症反应的理论已经得到公认。然而,迷走神经能否对肝癌的侵袭转移产生影响,还未见文献报道。二、目的明确迷走神经分布及调控与肝细胞癌复发转移的相关性,探讨关键迷走神经递质对人肝癌细胞迁移、侵袭能力所产生的影响及其相关的分子机制。三、方法1.收集原发及复发肝细胞癌患者的临床手术切除标本,利用免疫组织化学和Western Blot技术,探讨迷走神经与肝细胞癌复发转移的相关性。2.体外培养SMMC-7721和HepG2两种人肝癌细胞株,利用RT-PCR及免疫荧光技术检测其中迷走神经递质受体的表达表况,并用Transwell实验探讨迷走神经递质在细胞水平对人肝癌细胞迁移、侵袭能力产生的影响。3.分别在M受体和N受体激动剂和阻滞剂作用下培养SMMC-7721和HepG2两种人肝癌细胞株,通过Transwell实验,明确M受体和N受体激动或阻滞后对两种细胞迁移和侵袭能力的影响;利用Cell Titer Blue细胞活性检测技术,探讨迷走神经递质及M受体和N受体的激动剂和阻滞剂对两种细胞增殖能力的影响。最后,用Western Blotting检测在上述不同物质作用下SMMC-7721和Hep G2细胞中上皮-间质转化相关标志蛋白质的表达变化情况。四、结果1.在肝细胞癌肿瘤组织中有迷走神经纤维末稍分布,且其分布密度高于癌旁肝组织。这种现象的发生率在复发病例中更高,与原发病例相比差异显著。2.SMMC-7721和Hep G2细胞上均有NK-1受体及胆碱能受体(包括M受体和N受体)表达。P物质、乙酰胆碱、氯贝胆碱及尼古丁均能够促进SMMC-7721和HepG2细胞迁移和侵袭;其中,氯贝胆碱及尼古丁的这种作用可分别被阿托品和美加明所抑制。3.P物质、乙酰胆碱、氯贝胆碱、尼古丁、阿托品及美加明在短期内(96小时)不对SMMC-7721和Hep G2细胞的增殖产生影响。4.P物质、乙酰胆碱、氯贝胆碱及尼古丁可上调SMMC-7721和Hep G2细胞中N-Cadherin和Slug的表达,而下调E-Cadherin的表达;其中,氯贝胆碱及尼古丁的这种作用可分别被阿托品和美加明所抑制。五、结论1.在人肝细胞癌肿瘤组织中有迷走神经纤维分布,且复发病例肿瘤组织中迷走神经分布密度明显增高,迷走神经调控可能促进了肝细胞癌复发转移的形成。2.人肝癌细胞株上有NK-1受体及多种胆碱能受体表达;迷走神经通过释放P物质及乙酰胆碱,分别与NK-1受体及胆碱能受体(M、N受体)结合,促进人肝癌细胞发生上皮-间质转化,进而导致肿瘤细胞迁移、侵袭能力增强。
【关键词】：迷走神经 肝细胞癌 侵袭转移 上皮-间质转化
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 缩略语表4-6
• 英文摘要6-9
• 中文摘要9-11
• 第一章 前言11-13
• 第二章 迷走神经分布与肝细胞癌复发转移的相关性13-25
• 2.1 材料和方法13-20
• 2.2 结果20-23
• 2.3 讨论23-25
• 第三章 不同迷走神经递质对人肝癌细胞迁移、侵袭能力的影响25-45
• 3.1 材料和方法25-35
• 3.2 结果35-43
• 3.3 讨论43-45
• 第四章 迷走神经递质通过EMT促进人肝癌细胞迁移、侵袭45-66
• 4.1 材料和方法45-54
• 4.2 结果54-64
• 4.3 讨论64-66
• 全文总结66-67
• 参考文献67-71
• 文献综述 迷走神经对肝脏病理生理过程调节作用的研究进展71-78
• 参考文献75-78
• 攻读学位期间的研究成果78-79
• 致谢79

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李勇,黄瀛;S-100蛋白与周围神经[J];解剖学杂志;1995年05期

  本文关键词：迷走神经调控对肝癌侵袭转移的影响及其相关机制研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：476553