CDC25C对食管鳞状细胞癌放疗敏感性影响的实验研究

发布时间：2017-07-06 11:22

  本文关键词：CDC25C对食管鳞状细胞癌放疗敏感性影响的实验研究

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【摘要】：目的:探讨人食管鳞状细胞癌EC9706细胞中CDC25C的表达对放射治疗敏感性的影响。方法:1)构建靶向人CDC25C基因的特异性干扰质粒GV248-h CDC25C-sh RNA,通过慢病毒包装并转染EC9706细胞;培养出稳定转染靶向CDC25C干扰质粒的细胞株和稳定转染阴性质粒的细胞株;2)RT-PCR及Western blot鉴定转染前后细胞中CDC25C在m RNA和蛋白水平的表达情况;3)对两种细胞株进行不同剂量X线照射,采用MTT和细胞克隆形成实验分别检测其增殖活性及放射敏感性。结果:1)成功培养出稳定转染靶向CDC25C干扰质粒的细胞株Knockdown和稳定转染阴性质粒的细胞株Control。2)MTT实验结果显示随着X线照射剂量的增加,Knockdown和Control细胞的增殖活性均受到抑制,且Control细胞株的细胞增殖活性抑制更明显(p0.05)。3)细胞克隆形成实验发现经过X线处理后,空白对照组与实验组相比较,其存活分数下降更明显(p0.05)。结论:下调CDC25C的表达可降低食管鳞状细胞癌的放射敏感性和增殖活性。
【关键词】：CDC25C 辐射耐受性 食管肿瘤 RNA干扰
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.1
【目录】：

• 中文摘要6-7
• 英文摘要7-8
• 1 前言8-11
• 2 材料与方法11-28
• 2.1 实验材料11-15
• 2.1.1 实验细胞11
• 2.1.2 主要试剂及耗材11-12
• 2.1.3 主要实验仪器12-13
• 2.1.4 常用试剂配制13-15
• 2.2 实验方法15-28
• 2.2.1 细胞培养15-18
• 2.2.2 细胞转染18-20
• 2.2.3 筛选转染后最有效干扰CDC25C基因的细胞系20-25
• 2.2.4 MTT实验检测细胞照射后的增殖情况25-26
• 2.2.5 细胞克隆形成实验检测细胞照射后的克隆形成率26-27
• 2.2.6 统计方法27-28
• 3 结果28-36
• 3.1 稳定细胞株的建立28-30
• 3.2 筛选最有效干扰CDC25C的稳定转染细胞株30-32
• 3.2.1 RT-PCR检测慢病毒转染EC9706细胞后CDC25C在m RNA水平的表达30-31
• 3.2.2 Western blot检测慢病毒转染EC9706细胞后CDC25C蛋白的表达31-32
• 3.2.3 稳定转染CDC25C-sh RNA的细胞株的筛选与鉴定32
• 3.3 MTT实验检测Control和Knockdown组细胞照射后的增殖情况32-33
• 3.3.1 sh RNA转染EC9706细胞后生长活力观察32
• 3.3.2 X线照射后Control细胞株与Knockdown细胞株的增殖情况32-33
• 3.4 克隆形成法分析Control和Knockdown组细胞不同剂量照射后的细胞克隆存活情况33-36
• 4 讨论36-40
• 5 结论40-41
• 6 参考文献41-46
• 7 致谢46-47
• 8 附录47-56
• 附录A 英中文术语和缩略语对照表47-48
• 附录B 综述48-56
• 参考文献55-56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Bao-Zhong Li;Zhao-Li Chen;Su-Sheng Shi;Xiao-Li Feng;Xiao-Gang Tan;Fang Zhou;Jie He;;Overexpression of Cdc25C predicts response to radiotherapy and survival in esophageal squamous cell carcinoma patients treated with radiotherapy followed by surgery[J];Chinese Journal of Cancer;2013年07期

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本文编号：526012