膀胱癌BIU-87细胞株导向肽NYZL1靶向特异性的实验研究

发布时间：2017-07-08 19:19

  本文关键词：膀胱癌BIU-87细胞株导向肽NYZL1靶向特异性的实验研究

  更多相关文章： 膀胱癌 肿瘤导向肽 光学分子影像 靶向性

【摘要】：目的:通过体内、外检测技术验证肿瘤导向肽NYZL1与膀胱癌BIU-87细胞及其移植瘤结合的靶向特异性,为膀胱癌的分子靶向诊疗奠定理论基础。方法:首先采用多肽固相合成法合成导向肽NYZL1及其阴性对照肽sv NYZL1,用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)修饰,制备实验组和对照组荧光分子探针;然后向膀胱癌BIU-87细胞悬液中分别加入两种探针孵育,流式细胞仪(FCM)检测细胞平均荧光强度值,明确探针与细胞的亲和作用;再将膀胱癌BIU-87细胞爬片,分别加入两种探针孵育,激光共聚焦显微镜(LSCM)观察探针与细胞结合的荧光图像,明确其亲和作用特异性;最后选取16只SPF级BALB/c-nu雄性裸鼠。3~4周龄。体质量15~18g。成功构建膀胱癌BIU-87细胞荷瘤裸鼠模型。采用完全随机分组法分为2组,每组8只,尾静脉分别注入两种探针,4 h后,实验组和对照组各取5只荷瘤裸鼠,完整剖取肿瘤组织、心、肝、脾、肺、肾、膀胱和胆囊,光学分子成像系统观察肿瘤及各组织的荧光图像;24 h后,实验组和对照组各取3只荷瘤裸鼠,完整剖取肿瘤组织、心、肝、脾、肺、肾和膀胱,制作冰冻切片,LSCM观察肿瘤及各组织的荧光图像。结果:1、成功合成实验组探针FITC-氨基己酸-CSSPIGRHC(FITC-NYZL1),对照组探针FITC-氨基己酸-CRIGSPHSC(FITC-sv NYZL1)。2、体外研究发现,FCM检测体外实验组和对照组探针标记BIU-87细胞的平均荧光强度值分别为50.34±3.63和17.72±1.57,二者差异有统计学意义(P0.05)。LSCM观察实验组细胞可见明显的绿色荧光图像,而对照组细胞未见明显的绿色荧光图像。两组细胞FITC的平均荧光强度值分别为864.41±188.47和53.57±17.50,二者差异有统计学意义(P0.05)。3、体内研究发现,光学分子成像系统观察下,肿瘤组织、胆囊及膀胱可见明显荧光;其余器官如心、肝、脾、肺和肾等未见明显荧光。LSCM观察下,实验组的肿瘤组织中可见明显绿色荧光,而实验组其他器官(心、肝、脾、肺、肾和膀胱)和对照组肿瘤组织和其他器官中未见绿色荧光。结论:膀胱肿瘤导向肽NYZL1能够与膀胱癌BIU-87细胞及其移植瘤靶向特异性结合,并可携带荧光素标记肿瘤组织。肿瘤导向肽NYZL1可能成为膀胱癌分子靶向诊断的重要载体,为膀胱癌的分子靶向诊疗奠定了一定理论基础。
【关键词】：膀胱癌 肿瘤导向肽 光学分子影像 靶向性
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.14
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用缩写词中英文对照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-18
• 1.1 主要实验材料、试剂与仪器12-14
• 1.2 实验方法14-18
• 2 结果18-25
• 2.1 细胞体外培养18
• 2.2 裸鼠膀胱癌移植瘤模型的建立18-19
• 2.3 荧光分子探针FITC-NYZL1 和FITC-svNYZL1 的制备合成19-20
• 2.4 FCM检测实验组和对照组细胞平均荧光强度值20-21
• 2.5 LSCM观察荧光分子探针与细胞的结合并检测FITC的平均荧光强度值21-22
• 2.6 光学分子成像系统观察探针在体内器官的分布情况22-23
• 2.7 LSCM观察探针在组织中的分布情况23-25
• 3 讨论25-27
• 4 结论27-28
• 参考文献28-30
• 综述30-41
• 参考文献36-41
• 致谢41-42
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果42-43
• 个人简历43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王磊;王珏;范晋海;;新型膀胱肿瘤光学诊断技术研究进展[J];现代泌尿外科杂志;2013年02期

2 梁朝朝;周骏;;3D腹腔镜技术在泌尿外科的初步应用[J];中华腔镜泌尿外科杂志(电子版);2013年06期

，

本文编号：535939