连接蛋白及其组成的间缝隙连接对多发性骨髓瘤细胞药物敏感性的影响

发布时间：2017-08-29 00:30

  本文关键词：连接蛋白及其组成的间缝隙连接对多发性骨髓瘤细胞药物敏感性的影响

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【摘要】：目的体外分析骨髓间充质干细胞(BMMSCs)及骨髓瘤细胞株RPMI8226连接蛋白-43(Cx43)的表达,观察在共培养条件下两者是否可形成功能性缝隙连接(GJIC)以及阻断GJIC后BMMSCs对RPMI8226影响的是否发生变化;探讨Cx43及其组成的GJIC对骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞药物敏感性的影响。方法采用RT-PCR及免疫组化法测定BMMSCs、RPMI8226中Cx43的表达;生长曲线、PI标记流式细胞术(FCM)分析、Annexin V/PI双染法、多重液相蛋白定量技术(CBA)及western blotting法测定BMMSCs与RPMI8226细胞共培养后对RPMI8226细胞增殖、周期、凋亡、细胞因子分泌及凋亡相关蛋白的影响;18α-甘草次酸(α-GA)阻断两者间缝隙连接(GJIC)后RPMI8226细胞生物特性的变化及凋亡相关蛋白表达的变化。结果BMMSCs及RPMI8226细胞均表达Cx43,共培养24h后BMMSCs可促进RPMI8226细胞增殖;保护RPMI8226细胞免受抗肿瘤药物影响,明显下调硼替佐米(Bortezomib,BTZ)诱导的细胞凋亡(p0.05);细胞周期分析提示处于S期的比例显著增加(p0.05);阻断两者间GJIC后,BMMSCs促进RPMI8226细胞增殖能力减弱(p0.05),并可部分恢复对BTZ的敏感性,细胞周期分析处于S期的比例下降(p0.05)。共培养24h后,上清液中IL-6、IL-10和TGFβ水平均较单独培养时增加(p0.05),其中IL-6和IL-10水平较单独培养时显著增加(P0.01),而b FGF和IL-17水平共培养前后无明显变化(p0.05);使用α-GA阻断GJIC后,培养上清中细胞因子IL-6、IL-10和TGF-β水平明显下降(p0.05);共培养后BMMSCs可使RPMI8226细胞中凋亡相关蛋白Bcl-xl、Survivin、Cyclin D1表达上调(p0.05),加入α-GA阻断GJIC后,上述凋亡相关蛋白升高幅度下降(p0.05),Bcl-2则无明显变化(p0.05)。结论BMMSCs与多发性骨髓细胞株RPMI8226间可形成功能性GJIC,是BMMSCs促进MM细胞生存及介导其耐药的重要原因之一。
【关键词】：多发性骨髓瘤 间隙连接 Cx43 细胞因子 耐药
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.3
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 研究背景9-20
• 参考文献15-20
• 第一部分 CX43及其组成的GJIC对多发性骨髓瘤细胞药物敏感性的影响20-32
• 前言20
• 材料与方法20-23
• 结果23-29
• 讨论29-31
• 参考文献31-32
• 第二部分 CX43及其组成的GJIC影响多发性骨髓瘤的可能机制32-40
• 前言32
• 材料与方法32-34
• 结果34-36
• 讨论36-38
• 参考文献38-40
• 结论40-41
• 综述41-50
• 参考文献46-50
• 攻读硕士学位期间公开发表的论文50-51
• 本研究所获的基金资助51-52
• 中英文对照缩略词表52-53
• 致谢53-54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 谢家印;王东;;靶向于多发性骨髓瘤细胞和骨髓微环境的治疗进展[J];重庆医学;2008年20期

2 刘桂云;于辉;;Cx43基因启动子甲基化下调乳腺癌Cx43的表达[J];中国高等医学教育;2011年07期

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本文编号：750379