酵母双杂交系统在本科实验教学中的应用

发布时间：2021-10-11 20:10

　　酵母双杂交系统是目前鉴定体内蛋白相互作用最有效、应用最广泛的一项技术。为了将其运用于本科实验教学,设计了"利用酵母双杂交系统验证HIF-1α与Jab1相互作用"综合性实验。实验包括检测HIF-1α和Jab1在酵母细胞中的表达、毒性及自激活检测、HIF-1α与Jab1相互作用验证三部分。实验操作性强、结果直观,有利于学生深入、系统地理解并掌握酵母双杂交系统技术,有利于提高学生的科研思维及科研素养,有利于促进教学与科研的相互融合。 

【文章来源】：实验技术与管理. 2020,37(07)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

HIF-1α和Jab1在酵母中的蛋白表达检测

HIF-1α和Jab1自激活检测

将含pGBKT7、pGBKT7-HIF-1α酵母涂于SD/–Trp培养基上，将转入pGADT7、pGADT7-Jab1酵母涂于SD/–Leu培养基上，30℃倒置培养，观察比较酵母菌落的大小。如图3所示，含pGBKT7、pGBKT7-HIF-1α酵母菌大小基本一致；含pGADT7、pGADT7-Jab1酵母菌大小也基本一致。将含有pGBKT7、pGADT7、pGBKT7-HIF-1α和pGADT7-Jab1的酵母菌接种到合适的SD筛选培养基中，30℃、250 rpm培养，利用分光光度计检测酵母浓度。如图4所示，转染空载体和质粒的酵母菌（含pGBKT7、pGBKT7-HIF-1α、pGADT7、pGADT7-Jab1）生长曲线基本一致。该结果表明，HIF-1α和Jab1对酵母无毒性。图4 含HIF-1α和Jab1酵母细胞的生长曲线

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3431163