机械牵张成骨细胞对NPNT的调控作用
发布时间：2021-02-15 08:32
研究目的:骨血管分布密集且广泛,在骨的生长发育中,骨血管不仅提供必需的氧和营养物质,而且通过调节各种骨细胞和血管细胞间的相互作用,为骨形成提供必要的刺激信号。局部血管的变化也与许多骨疾病的发展密切相关,如骨质疏松、骨坏死、骨关节炎、佝偻病、缺血性坏死、骨肿瘤的发生与转移等。骨血管与骨形成相伴发生,骨细胞可分泌促血管生成因子来触发信号引起不同细胞（包括形成血管的内皮细胞以及软骨细胞、成骨细胞、破骨细胞等）释放相关细胞因子进一步促进血管生成。与此同时,骨血管内皮细胞释放的因子对软骨细胞及成骨细胞也起到一定的作用。近年来有研究报道,肾连蛋白（nephronectin,NPNT）是由成骨细胞分泌的重要的血管生成因子,并且在调节骨代谢过程中也有着重要的作用。因此,本研究探究机械牵张成骨细胞对NPNT的调控作用,为进一步探究运动是否可以通过成骨细胞表达细胞因子调控骨微环境血管生成提供理论基础,也为骨质疏松等相关骨疾病的治疗提供新思路。研究方法:1.将培养的MC3T3-E1成骨细胞分为4组（C组,S1组,S2组和S3组）,以1×105/ml接种到BioFlex 6孔板,细胞长至...
【文章来源】：上海体育学院上海市
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞NPNT蛋白表达情况的影响
2h4h01234S**NPNTmRNA相对表达量图 3 机械牵张应力刺激对原代成骨细胞 ALP、RUNX2、Osterix 和 NPNT mRNA表达的影响（*：P<0.05，**：P<0.01）5.2.2ALP 染色结果本研究检测了 3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激对成骨细胞 ALP 分泌情况的影响。如图 4 所示，ALP 阳性细胞呈蓝紫色，并且颜色越深面积大代表 ALP 分泌越多，由图 4 所知，机械牵张应力刺激组相对对照组的蓝色细胞颜色深、面积大，ALP 分泌多，说明 3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激可以促进成骨细胞 ALP 的分泌。
图 5 机械牵张应力刺激对原代成骨细胞 NPNT 蛋白表达情况的影响（a.Westernblot 代表性图；b.NPNT 蛋白表达量统计分析）5.2.4 免疫组织化学染色结果本研究了对原代成骨细胞进行 3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激后，采用免疫组织化学染色检测了成骨细胞 NPNT 的表达情况。如图6所示，机械牵张应力刺激组的染色结果较对照组棕红色颜色深，说明NPNT表达的量多。提示，3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激可促进 NPNT 的表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]VEGF和EGFL在骨血管生成中的作用[J]. 仝晓阳,李慧,张苗,陈熙,邹军. 中国细胞生物学学报. 2017(11)
[2]EGFL7在肿瘤血管生成及侵袭转移中的研究进展[J]. 王运良,李智. 中华介入放射学电子杂志. 2017(02)
[3]心梗大鼠持续和间歇运动干预的心肌血管新生相关miRNAs表征与EGFL7/miR126-PIK3R2/SPRED1通路激活的心脏保护效应[J]. 宋伟,田振军,Shao-jun Du. 体育科学. 2017(02)
[4]运动对骨代谢信号通路影响的研究进展[J]. 仝晓阳,张玲莉,郭健民,元宇,邹军. 中国康复理论与实践. 2016(12)
[5]VEGF及其受体的生物学特性及在肿瘤血管生成中的作用[J]. 马莉. 中国优生与遗传杂志. 2016(05)
[6]不同牵张应力对成骨细胞MC3T3-E1分化及Wnt信号转导通路的影响研究[J]. 陈熙,郭健民,元宇,张玲莉,吴隽旎,孙忠广,陈炳霖,邹军. 中国骨质疏松杂志. 2016(01)
[7]OPG/RANKL/RANK信号通路在运动与骨免疫学中的研究进展[J]. 元宇,郭健民,邹军. 中国骨质疏松杂志. 2015(08)
[8]VEGF及其受体的生物学特性[J]. 邹文萍,唐国强,李光明. 四川生理科学杂志. 2012(03)
本文编号：3034531
【文章来源】：上海体育学院上海市
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞NPNT蛋白表达情况的影响
2h4h01234S**NPNTmRNA相对表达量图 3 机械牵张应力刺激对原代成骨细胞 ALP、RUNX2、Osterix 和 NPNT mRNA表达的影响（*：P<0.05，**：P<0.01）5.2.2ALP 染色结果本研究检测了 3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激对成骨细胞 ALP 分泌情况的影响。如图 4 所示，ALP 阳性细胞呈蓝紫色，并且颜色越深面积大代表 ALP 分泌越多，由图 4 所知，机械牵张应力刺激组相对对照组的蓝色细胞颜色深、面积大，ALP 分泌多，说明 3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激可以促进成骨细胞 ALP 的分泌。
图 5 机械牵张应力刺激对原代成骨细胞 NPNT 蛋白表达情况的影响（a.Westernblot 代表性图；b.NPNT 蛋白表达量统计分析）5.2.4 免疫组织化学染色结果本研究了对原代成骨细胞进行 3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激后，采用免疫组织化学染色检测了成骨细胞 NPNT 的表达情况。如图6所示，机械牵张应力刺激组的染色结果较对照组棕红色颜色深，说明NPNT表达的量多。提示，3%牵张幅度，4h，连续 7 天隔天干预的机械牵张应力刺激可促进 NPNT 的表达。
【参考文献】：
期刊论文
[1]VEGF和EGFL在骨血管生成中的作用[J]. 仝晓阳,李慧,张苗,陈熙,邹军. 中国细胞生物学学报. 2017(11)
[2]EGFL7在肿瘤血管生成及侵袭转移中的研究进展[J]. 王运良,李智. 中华介入放射学电子杂志. 2017(02)
[3]心梗大鼠持续和间歇运动干预的心肌血管新生相关miRNAs表征与EGFL7/miR126-PIK3R2/SPRED1通路激活的心脏保护效应[J]. 宋伟,田振军,Shao-jun Du. 体育科学. 2017(02)
[4]运动对骨代谢信号通路影响的研究进展[J]. 仝晓阳,张玲莉,郭健民,元宇,邹军. 中国康复理论与实践. 2016(12)
[5]VEGF及其受体的生物学特性及在肿瘤血管生成中的作用[J]. 马莉. 中国优生与遗传杂志. 2016(05)
[6]不同牵张应力对成骨细胞MC3T3-E1分化及Wnt信号转导通路的影响研究[J]. 陈熙,郭健民,元宇,张玲莉,吴隽旎,孙忠广,陈炳霖,邹军. 中国骨质疏松杂志. 2016(01)
[7]OPG/RANKL/RANK信号通路在运动与骨免疫学中的研究进展[J]. 元宇,郭健民,邹军. 中国骨质疏松杂志. 2015(08)
[8]VEGF及其受体的生物学特性[J]. 邹文萍,唐国强,李光明. 四川生理科学杂志. 2012(03)
本文编号：3034531
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