自由转轮运动通过miR-130a介导自噬延缓大鼠脑衰老的机制研究

发布时间：2021-05-07 07:55

　　目的:探究自由转轮运动对miR-130a介导的细胞自噬在大鼠脑衰老进程中的调控作用。方法:1.动物实验:采用体重为160±20g的SPF级雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30只。其中选取10周龄大鼠20只,随机分为衰老对照组（OC）和衰老自由转轮组（OVR）,每组10只。实验进行前,所有大鼠进行2周的适应性喂养后,将OC组与OVR组饲养至21月龄构建自然衰老模型。然后将OVR组大鼠放入自由转轮笼内饲养8周至23月龄,OC组大鼠自然饲养至23月龄,不做干预处理。自由转轮运动干预后,另取10只3月龄大鼠作为年轻对照组（YC）,并将所有大鼠眼球取血后断颈处死,冰上分离其海马与大脑皮层组织并立即放入-80℃冰箱保存。采用Real-time-PCR检测海马组织内miRNA的变化;TUNEL染色评价海马内细胞凋亡水平;透射电镜观察海马中自噬小体变化;Western blot检测海马内衰老相关蛋白的表达来验证其衰老程度,检测自噬与凋亡相关蛋白的变化来评估自噬与凋亡的水平。2.细胞实验:培养神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）细胞,在细胞融合度达到70%左右接种6孔板。分为对照组（Con）、... 

【文章来源】：武汉体育学院湖北省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词表
1.前言
2.文献综述
    2.1 衰老及其相关疾病
        2.1.1 衰老的概念
        2.1.2 衰老与神经退行性疾病
    2.2 细胞自噬与衰老
        2.2.1 细胞自噬
        2.2.2 自噬的通路调控
        2.2.3 自噬与衰老的关系
    2.3 细胞凋亡与衰老
    2.4 miRNA与衰老
    2.5 运动与衰老
    2.6 小结
3.实验对象以及实验方法
    3.1 自由转轮运动对自然衰老大鼠脑衰老的影响
        3.1.1 实验对象
        3.1.2 实验方法与材料
    3.2 体外实验验证miR-130a的作用
        3.2.1 培养SH-SY5Y细胞
        3.2.2 细胞转染
        3.2.3 细胞样品收集
        3.2.4 Real-time-PCR及Western blot步骤
        3.2.5 实验数据分析
    附表1：主要仪器
    附表2：主要试剂
4.实验结果
    4.1 自由转轮运动对衰老大鼠海马内miRNA表达的影响
    4.2 自由转轮运动抑制衰老大鼠海马内衰老相关蛋白的表达
    4.3 自由转轮运动降低衰老大鼠海马的细胞凋亡
    4.4 自由转轮运动激活衰老大鼠海马内的细胞自噬
    4.5 自由转轮运动调控衰老大鼠海马自噬的信号通路
    4.6 过表达miR-130mimic在SH-SY5Y细胞衰老中的调控作用
5.分析与讨论
结论
创新点
展望
致谢
参考文献
附录


【参考文献】：
期刊论文
[1]抗衰老机制研究进展[J]. 莫睿,魏智民,杨云生.  解放军医学杂志. 2017(08)
[2]衰老动物模型的研究及其在抗衰老药物活性筛选中的应用[J]. 周玉枝,闫明亮,高丽,秦雪梅,杜冠华.  中草药. 2017(06)
[3]衰老动物模型的研究进展[J]. 王喆,李瑞生.  中国比较医学杂志. 2013(03)
[4]三种不同方法建立小鼠衰老模型的比较[J]. 洪亮,方胜.  中国老年学杂志. 2010(18)
[5]老年性痴呆动物模型研究[J]. 方芳,晏勇.  国外医学.神经病学神经外科学分册. 2004(05)
[6]Caspase-3:治疗神经退行性疾病的新靶点[J]. 张亚辉,李佳,周忠良.  生物化学与生物物理进展. 2003(02)



本文编号：3173035