高、低强度耐力训练对SAMP6小鼠股四头肌Sirt3及SESNS抗氧化相关基因的影响

发布时间：2017-05-01 10:00

  本文关键词：高、低强度耐力训练对SAMP6小鼠股四头肌Sirt3及SESNS抗氧化相关基因的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：随着我国老年人口的不断增加,老年人的身体健康问题逐渐受到人们重视,Sarcopenia或肌肉衰减综合症是影响老年人健康的重要问题之一。Sarcopenia是与年龄相关的肌肉质量和功能的退化。这种衰老状况导致日常生活中出现老年人跌倒、骨折创伤等现象。随之而来的治疗,给老年人自身、家庭和社会带来了沉重负担。在Sarcopenia中,线粒体功能的紊乱是引起Sarcopen ia的主要因素之一,骨骼肌衰老过程中会出现整体的线粒体功能下降,包括线粒体生物发生下降、线粒体氧化应激的增强、ATP生成效率的下降等。而其中线粒体氧化应激在线粒体功能紊乱中饰演重要角色,线粒体是机体活性氧的主要来源,衰老过程中活性氧生成的增多以及抗氧化酶的活性下降使得氧化应激发生。衰老过程中,骨骼肌内氧化应激的增强诱导肌纤维凋亡,同时扰乱蛋白质代谢平衡,这可能是导致肌肉衰减综合症的重要机制。目的：本研究旨在探索Sirt3 与 Senstrins相关抗氧化基因在小鼠股四头肌氧化应激过程中的作用。本文计划以4周高、低强度的跑台运动为耐力训练干预手段,3月龄P6品系快速老化小鼠(Senescence Accelerated Mouse, S AMP6)为本实验的研究对象,从而探讨高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌Sirt3与Senstrins抗氧化相关基因的影响。这将为运动预防及延缓Sarcopenia等疾病提供理论科学依据。方法：购买15只雄性SAMP6小鼠,随机分为高强度组(H)、低强度组(L)、衰老对照组(P),此外5只SAMR1小鼠作为正常对照组(R)。训练结束后,断颈处死,取完整股四头肌,利用荧光定量Real-time PCR的方法检测抗氧化相关基因Sirt3/PGC-la/P53/Sesnl/Sesn2mRNA相对表达水平,Western Blotting免疫印迹的方法检测抗氧化相关Sirt3/PGC-la/P53/Sesnl/Ses n2蛋白表达水平。结果：与对照组相比,运动组Sirt3蛋白和mRN A表达水平均有升高趋势,但不具有显著性差异。L组PGC-1α蛋白表达水平显著高于P组(p0.05),同时L组PGC-la mRNA表达水平显著高于R组而显著低于H组(p0.05)。P53蛋白表达水平,L组显著高于R组(p0.05)。Sesnl mRNA表达水平,H组显著高于L组(p0.05),与R组相比,L组的Sesn1蛋白表达水平显著升高(p0.05)。H组的Ses n2蛋白表达水平显著高于P组(p0.05)和L组(p0.05),L组的Sesn2蛋白表达水平也显著高于P组(p0.05)。结论：1、在衰老过程中,骨骼肌伴随质量和力量的下降,而不同强度耐力训练可通过一些应激蛋白及抗氧化酶来适度调节机体的新陈代谢,氧化还原状况等。2、高强度耐力训练使得小鼠股四头肌SESN2蛋白表达升高可能是由于高强度耐力训练使得机体产生了较高程度的缺氧状态。高强度耐力训练使得PGC-1α mRNA活性下降,可能是由于高强度耐力训练使得PGC-1α mRN A活性不具有持续性效应。3、虽然运动使得Sirt3、PGC-1α、P53、Sesn1、Sesn2 在 mRNA和蛋白水平上产生了一些适应性的改变,但Sirt3、PGC-1α、P53、Sesn1、Sesn2 在 mRNA和蛋白水平上存在不协调性,可能是由于高、低强度耐力训练涉及多种途径的调控。
【关键词】：活性氧 耐力训练 氧化应激 骨骼肌
【学位授予单位】：华东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：G804.7
【目录】：

• 论文摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 第一部分 文献综述12-28
• 1. ROS与Sarcopenia12-14
• 1.1 ROS的产生12
• 1.2 ROS与氧化应激的关系12-14
• 2. Sirt3与Sestrins的抗氧化作用14-22
• 2.1 Sirtuins家族14-16
• 2.2 Sirtuins家族与氧化应激16-18
• 2.2.1 Sirtuins家族参与缓解心血管疾病氧化应激16-17
• 2.2.2 Sirtuins家族参与缓解心肌细胞与神经细胞氧化应激17-18
• 2.3 Sirt3与氧化应激18-22
• 3. Sestrins的抗氧化作用22-26
• 3.1 过氧化物氧还蛋白家族22-24
• 3.2 Sestrins对PRDXs的还原作用24-26
• 4. 运动与Sirt3、Sestrins及氧化应激的关系26-28
• 第二部分 实验部分28-45
• 前言28
• 1. 材料和方案28-31
• 1.1 实验动物28-29
• 1.2 训练方案29
• 1.3 取材29-30
• 1.4 主要仪器与试剂30-31
• 2 实验方法31-35
• 2.1 RT-PCR检测相关基因表达31-34
• 2.2 Western Blotting检测相关蛋白表达34
• 2.3 数据统计34-35
• 3. 实验结果35-39
• 3.1 高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌抗氧化相关的mRNA表达的影响35-36
• 3.2 高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌抗氧化相关的蛋白表达的影响36-39
• 4. 分析与讨论39-45
• 4.1 高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌Sirt3mRNA和蛋白表达水平的影响39-40
• 4.2 高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌PGC-1α mRNA和蛋白表达水平的影响40-42
• 4.3 高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌P53mRNA和蛋白表达水平的影响42-43
• 4.4 高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌SESN2mRNA和蛋白表达水平的影响43-44
• 4.5 高、低强度耐力训练对衰老小鼠股四头肌SESN1mRNA和蛋白表达水平的影响44-45
• 结论与建议45-47
• 参考文献47-54
• 附录54-55
• 后记55

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