8周游泳运动对非酒精性脂肪肝大鼠骨骼肌细胞自噬的影响

发布时间：2017-09-08 06:48

  本文关键词：8周游泳运动对非酒精性脂肪肝大鼠骨骼肌细胞自噬的影响

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【摘要】：目的:观察非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠骨骼肌细胞自噬变化情况,探讨有氧运动对NAFLD大鼠骨骼肌自噬相关蛋白表达水平的影响。方法:50只SD大鼠随机分为5组:实验8周、16周空白对照组(C8组、C16组),普通饲料喂养;实验8周、16周NAFLD模型组(M8组、M16组)、模型运动干预组(EM组),高脂饲料喂养。8周后检测C8和M8组肝脏形态及血液生化指标,确定NAFLD发生率。此后,EM组完成60min/d、6d/w的8周无负重游泳运动,观察C16、M16和EM组肝脏形态和细胞HE染色;测定血糖(FPG)、胰岛素(FINS)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)值,并且计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);电镜观察腓肠肌超微结构,Western blotting检测骨骼肌自噬蛋白LC3、Beclin-1蛋白表达情况。结果:1.HE染色C8组肝细胞未见明显脂肪变性,M8组10只中有8只出现明显肝细胞脂肪变性,细胞空泡、气球样变,肝细胞排列紊乱,未见坏死病灶,门管区无炎细胞浸润或纤维组织增生;C16组10只中有2只可见少量肝细胞脂肪变性,M16组10只皆出现明显肝细胞脂肪变性,汇管区有肝窦扩张、淤血,可见肝小叶炎症;EM组9只,6只可见肝细胞脂肪变性,程度较M16组轻,未见炎症坏死或纤维组织增生。2.与C8组比较,M8组血清ALT、AST、TC、TG含量均上升,并且TC值具有统计学意义(P0.05),其余未见显著性差异(P0.05);与C16组比较,M16组血清ALT、AST、TC、TG含量均上升,但未见显著性差异(P0.05);EM组较M16组血清ALT、AST、TC、TG含量降低,但未恢复到C16组水平,均未见显著性差异(P0.05)。3.与C16组比较,M16组FPG、FINS升高,HOMA-IR指数升高,具有统计学意义(P0.05);LC3、Beclin1自噬蛋白降低,具有极显著性差异(P0.01)。4.与M16组比较,EM组FPG、FINS和HOMA-IR指数降低,未见显著性差异(P0.05);并且未恢复到C16组水平,具有统计学意义(P0.05);与M16组比较,EM组LC3、Beclin-1自噬蛋白水平表达升高,未见显著性差异(P0.05);并且未达C16组水平,具有极显著性差异(P0.01)。结论:1.8周高脂饮食可以诱发80%SD大鼠产生NAFLD,随着时间推移,NAFLD的脂变程度与发生率加重。2.NAFLD大鼠骨骼肌细胞自噬降低,表现为LC3-II、Beclin-1蛋白表达量LC3-II/LC3-I比值下调,8周游泳运动可使上述指标升高,提示有氧运动可通过提升骨骼肌自噬水平,对骨骼肌细胞产生一定的保护作用。
【关键词】：运动 非酒精性脂肪肝 细胞自噬 骨骼肌 胰岛素抵抗
【学位授予单位】：成都体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：G804.7
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 1 前言10-12
• 2 文献综述12-20
• 2.1 关于脂肪肝的发生机制12-14
• 2.1.1 酒精性脂肪肝（AFLD）12
• 2.1.2 非酒精性脂肪肝（NAFLD）12-14
• 2.2 细胞自噬14-18
• 2.2.1 细胞自噬概述14-15
• 2.2.2 自噬发生过程的分子机制15-16
• 2.2.3 细胞自噬的调控16-18
• 2.3 胰岛素抵抗与细胞自噬18
• 2.4 运动训练对骨骼肌细胞自噬的影响18-20
• 3 材料与方法20-26
• 3.1 研究对象及分组20-21
• 3.2 运动训练方法21
• 3.3 样本采集处理与指标检测21-25
• 3.3.1 样本采集21
• 3.3.2 生化指标检测21-22
• 3.3.3 组织病理学检测22
• 3.3.4 Western Blotting检测22-24
• 3.3.5 HOMA-IR指数的计算24-25
• 3.4 数据分析25-26
• 4 实验结果26-37
• 4.1 大鼠一般情况观察26
• 4.2 大鼠形态学结构变化26-30
• 4.2.1 大鼠肝脏外观情况26-27
• 4.2.2 光镜下大鼠肝脏结构变化27-30
• 4.3 SD大鼠体重变化情况30-31
• 4.4 SD大鼠AST、ALT水平的变化31-33
• 4.5 SD大鼠TC、TG水平变化33-34
• 4.6 SD大鼠FPG、FINS和HOMA-IR指数的变化34-35
• 4.7 SD大鼠Western Blotting检测LC3与Beclin-1 的水平变化35-37
• 5 分析与讨论37-43
• 5.1 非酒精性脂肪肝模型的建立37-38
• 5.2 非酒精性脂肪肝大鼠体重变化及运动的干预作用38
• 5.3 非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗变化及运动干预作用38-39
• 5.4 非酒精脂肪肝大鼠骨骼肌超微结构变化及运动干预作用39-40
• 5.5 非酒精性脂肪肝大鼠骨骼肌LC3蛋白变化及运动干预作用40-41
• 5.6 非酒精性脂肪肝大鼠骨骼肌Beclin-1 蛋白变化及运动干预作用41-43
• 6 结论43-44
• 7 参考文献44-50
• 致谢50

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本文编号：812521