停训小鼠骨骼肌卫星细胞激活及其激活因子MyoD、HGF、MGFmRNA动态变化的研究

发布时间：2017-10-09 03:10

  本文关键词：停训小鼠骨骼肌卫星细胞激活及其激活因子MyoD、HGF、MGFmRNA动态变化的研究

  更多相关文章： 停训 卫星细胞 激活 MyoD HGF MGFmRNA

【摘要】：研究目的:本文章通过对停训小鼠骨骼肌卫星细胞激活及其激活因子Myo D、HGF、MGFm RNA变化的研究,分析肌卫星细胞激活及其激活因子在停训不同时相动态变化的特征,为探讨停止训练后失重骨骼肌废用性萎缩的可能性始动机制,以及因停止训练所引起的废用性肌肉萎缩的治疗和预防提供参考资料。试验方法:本研究中,选取健康雄性5周龄昆明小鼠48只,适应环境和适应跑台训练各3天后,随机分为安静对照组(C组,n=8)和实验组(E组,n=40)。实验组(E组,n=40),根据取材时间点的不同随机分为停止训练0h实验组(E0组,n=8)、12h实验组(E1组,n=8)、24h实验组(E2组,n=8)、3d实验组(E3组,n=8)、7d实验组(E4组,n=8)。安静对照组正常笼养8周,实验组进行8周递增负荷跑台训练,且最后一次停训后即刻,C组和E0组脱臼且取左右后肢股四头肌。采用免疫组化、ELISA试验方法、RT-PCR法,测停训不同时间肌肉组织中肌卫星细胞激活(Pax7为激活标记蛋白)及激活因子Myo D、HGF、MGFm RNA的表达;E1组、E2组、E3组、E4组8周运动后尾部悬吊,后肢离地,身体长轴与水平夹角为30°,前肢自由活动保证小鼠自由饮食饮水。E1组、E2组、E3组、E4组分别于停训尾部悬吊12h、24h、3d、7d做上述同样取材和测试。把实验数据输入Microsoft Excel中存储,建立数据库,采用SPSS17.0 for windows软件系统处理实验数据,所有数据统计结果均以均值±标准差(x±SD)表示。C组、E0组、E1组、E2组、E3组、E4六组之间采用单因素方差(One-Way ANOVA)分析,并进行后续检验的多重比较(Post Hoc Multiple Comparisons),P0.05表示差异具有显著性,P0.01表示差异具有非常显著性。实验结果:8周递增负荷跑台停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活及激活因子的变化均呈先上升后下降趋势。(1)股四头肌总湿重体重比在停训24h达到最大值,且非常显著性增加(P0.01);(2)SC激活活性在停训12h达到峰值,且非常显著性增加(P0.01);(3)激活因子Myo D蛋白表达在停训24h达到峰值,且非常显著性增加(P0.01);(4)激活因子HGF含量在停训12h达到峰值,且非常显著性增加(P0.01);(5)激活因子MGFm RNA的表达在停训12h达到峰值,且非常显著性增加(P0.01)。结论:(1)从小鼠骨骼肌湿重体重比相关指标分析得出,停训24h此指标达到最大值,之后肌肉湿重体重比呈下降趋势直至停训7d基本完全恢复;(2)从小鼠骨骼肌卫星细胞激活角度分析得出,停训12h卫星细胞活性达到峰值,之后开始降低直至7d基本完全恢复;(3)从小鼠骨骼肌卫星细胞激活因子动态变化得出,停训不同时相各激活因子变化趋势基本相似,停训12-24h期间均达到峰值,之后均呈下降趋势。提示停训12-24h期间是进行预防和治疗停训肌肉萎缩的最佳时刻。
【关键词】：停训 卫星细胞 激活 MyoD HGF MGFmRNA
【学位授予单位】：山东体育学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：G804.2
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 英文缩略词表10-11
• 前言11-12
• 1 研究综述12-19
• 1.1 运动与骨骼肌卫星细胞的激活12-14
• 1.2 运动与骨骼肌卫星细胞激活因子14-18
• 1.2.1 运动与卫星细胞激活通路—NO14-15
• 1.2.2 运动与卫星细胞激活因子—生肌调节因子（MyoD）15-16
• 1.2.3 运动与卫星细胞激活抑制因子—肌肉生长抑制素（MSTN）16-17
• 1.2.4 运动与卫星细胞激活因子—机械生长因子（MGF）17-18
• 1.3 小结18-19
• 2 研究方法19-29
• 2.1 研究对象及分组19-20
• 2.1.1 研究对象19
• 2.1.2 动物分组19-20
• 2.2 运动方案和停训模型的建立20-21
• 2.2.1 适应性跑台训练20
• 2.2.2 运动训练方案20
• 2.2.3 停训模型的建立20-21
• 2.3 测试方法21-28
• 2.3.1 体重测试并观察小鼠一般情况21
• 2.3.2 动物取材21
• 2.3.3 免疫组化骨骼肌组织修整21
• 2.3.4 ELISA骨骼肌组织匀浆制备21
• 2.3.5 RT-PCR 骨骼肌组织匀浆制备21-22
• 2.3.6 实验主要仪器22
• 2.3.7 实验主要试剂22-23
• 2.3.8 实验步骤23-28
• 2.4 统计方法28-29
• 3 实验结果29-36
• 3.1 八周递增负荷运动期间、停训后不同时相小鼠一般情况及体重的变化情况29-30
• 3.2 八周递增负荷停训后不同时相小鼠后肢股四头肌总湿重（左侧+右侧）/体重比（RM）的变化情况30-31
• 3.3 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活的变化情况 --- 202131-33
• 3.4 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活因子—MyoD的变化情况33-35
• 3.5 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活因子—HGF的变化情况35
• 3.6 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活因子—MGFmRNA表达的变化情况35-36
• 4 分析与讨论36-42
• 4.1 小鼠骨骼肌卫星细胞激活运动训练模型的分析36
• 4.2 八周递增负荷停训不同时相小鼠体重和股四头肌湿重体重比变化情况的分析36-38
• 4.3 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活变化情况的分析 - 3038-39
• 4.4 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活因子—MyoD变化情况的分析39-40
• 4.5 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活因子—HGF变化情况的分析40-41
• 4.6 八周递增负荷停训不同时相小鼠骨骼肌卫星细胞激活因子—MGFmRNA表达情况的分析41-42
• 5 结论42-43
• 参考文献43-50
• 致谢50-51
• 科研成果51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 史冀鹏;徐红旗;高晓娟;张学林;周越;李俊平;王瑞元;;一次性离心运动及针刺对大鼠骨骼肌生肌调节因子的影响[J];北京体育大学学报;2014年10期

，

本文编号：997809