人PD-L1基因启动子克隆及其荧光素酶报告基因载体的构建

发布时间：2017-10-21 03:45

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【摘要】：目的:对人源PD-L1基因启动子进行PCR扩增,构建PD-L1荧光素酶报告基因。方法:用PCR扩增方法获得PD-L1基因启动子;PD-L1启动子和载体行KpnⅠ、XhoⅠ酶切、连接和转化,然后行菌落PCR以及测序等。构建成功后转染至A549细胞中并检测PD-L1启动子活性。结果:经PCR方法扩增出PD-L1基因启动子片段,;菌落PCR鉴定各重组体构建正确并经生工测序成功;瞬时转染A549细胞后经报告基因检测得知所克隆的不同片段序列具有启动子活性。结论:成功克隆PD-L1基因启动子,构建出不同片段基因启动子荧光素酶报告基因,为进一步研究其分子机制提供详实基础。
【作者单位】： 皖南医学院第一附属医院弋矶山医院肿瘤内科;皖南医学院麻醉学院;皖南医学院法医学院;皖南医学院医学影像与检验学院;皖南医学院医学生物学教研室;
【关键词】： PD-L 启动子克隆 双荧光素酶报告基因
【分类号】：Q78;R73-3
【正文快照】： 程序性细胞死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)为PDCD1基因编码的Ⅰ型跨膜糖蛋白[1],PD-1表达于活化的免疫细胞表面,如CD4+T细胞、B细胞等[2]。PD-L1(programmed death-1-ligand 1,程序性死亡配体-1)是程序性细胞死亡蛋白1的配体之一,同属CD28/B7家族。PD-L1多表达于肿瘤细胞

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本文编号：1071121