沉默RNF181基因表达可促进结肠癌SW480细胞的生长

发布时间：2017-10-24 06:29

  本文关键词：沉默RNF181基因表达可促进结肠癌SW480细胞的生长

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【摘要】：目的 :研究沉默环指蛋白181(ring finger protein 181,RNF181)基因表达对结肠癌细胞SW480生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用慢病毒感染的方法将靶向沉默RNF181基因表达的重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入人结肠癌SW480细胞中[以感染重组慢病毒颗粒LV3-negative control(NC)为阴性对照)]。病毒感染48 h后,分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测SW480细胞中RNF181m RNA及蛋白的表达水平;CCK-8法和平板克隆法检测RNF 181基因沉默对SW480细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及其磷酸化ERK(phospho-ERK,p-ERK)表达的影响。结果 :实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,重组慢病毒颗粒LV3-RNF181-KD转入SW480细胞后,细胞中RNF181 m RNA和蛋白的表达水平均较阴性对照组(感染重组慢病毒颗粒LV3-NC的SW480细胞)明显下调,差异均有统计学意义(P值均0.01)。CCK-8及平板克隆实验证实,沉默RNF181基因表达后SW480细胞的增殖能力明显增强(P值均0.01)。细胞中ERK蛋白的表达水平无明显变化(P0.05),而p-ERK蛋白的表达水平明显升高(P0.01)。结论 :沉默RNF181基因的表达可增强人结肠癌细胞SW480的增殖能力,其机制可能与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activate protein kinase,MAPK)/ERK信号转导通路的活化有关。
【作者单位】： 南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所;南方医科大学中医药学院;
【关键词】： 结肠肿瘤 慢病毒感染 RNF基因 细胞增殖
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81201663,81171959)~~
【分类号】：R735.35
【正文快照】： 结直肠癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,其发病率在男性中居第3位,仅次于肺癌和前列腺癌;而在女性中居第2位,仅次于乳腺癌。据保守估计,2012年全球约有140万例结直肠癌新发病例,死亡约69.4万例[1]。近年来,得益于结直肠癌早期筛查,发达国家结直肠癌的发病率和死亡率稳中有降[2],，

本文编号：1087490