团头鲂白细胞介素6基因启动子报告载体的构建及活性分析

发布时间：2017-10-28 02:26

  本文关键词：团头鲂白细胞介素6基因启动子报告载体的构建及活性分析

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【摘要】：为了解鱼类白细胞介素6(IL-6)基因的转录调控原理及其免疫作用机制,构建5个团头鲂il-6基因启动子的荧光素酶报告质粒(PGL3-IL-6P),以PGL3-basic质粒作为阴性对照,将它们分别与内参质粒pRL-TK共转染进鲤EPC细胞,并用100ng/mL的LPS诱导转染过重组载体的细胞,24h后检测荧光素酶的活性。结果显示:与阴性对照组相比,质粒转染组PGL3-IL-6P-0、PGL3-IL-6P-1、PGL3-IL-6P-2、PGL3-IL-6P-3与PGL3-IL-6P-4的荧光素酶活性均明显升高,其中PGL3-IL-6P-4组的荧光素酶活性最高,表明该启动子缺失体(-379至+34)包含il-6的核心启动子。用LPS刺激转染过重组载体的细胞后发现,与未经LPS刺激的对照组相比,仅PGL3-IL-6P-4组的活性明显增强,而其余缺失体的活性则没有显著变化,这进一步表明PGL3-IL-6P-4缺失体包含核心启动子区,并推测该核心启动子区域存在的潜在转录因子NF-κB与C/EBPβ等可能是响应LPS刺激的重要作用元件。
【作者单位】： 华中农业大学水产学院/农业部淡水生物繁育重点实验室;淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心;西北农林科技大学动物科技学院;
【关键词】： 团头鲂 白细胞介素 荧光素酶报告质粒 启动子活性 LPS
【基金】：国家自然科学基金项目(31572613) 国家科技支撑计划(2012BAD26B00) 中央高校基本科研业务费专项(2014PY042和2662015PY134)
【分类号】：S917.4
【正文快照】： 白细胞介素6(IL-6)是一种多功能细胞因子,在调控动物免疫应答反应、急性期蛋白的合成和造血功能等方面具有非常重要的作用。许多细胞,如活化的T/B淋巴细胞、单核-巨噬细胞、血管内皮细胞、肿瘤细胞、肝细胞、造血干细胞、神经细胞等[1-2]都可以产生IL-6。正常状态下,动物血浆

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王为民;;团头鲂养殖产业现状[J];科学养鱼;2009年04期

2 张涓;陈思思;何玉慧;黄金海;刘小玲;陈孝煊;袁改玲;;团头鲂β-防御素1基因cDNA的克隆、序列分析及表达特征[J];华中农业大学学报;2015年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 曾聪;曹小娟;高泽霞;罗伟;钱雪桥;王卫民;;团头鲂生长性状的遗传力和育种值估计[J];华中农业大学学报;2014年02期

2 曾聪;张耀;曹小娟;罗伟;刘肖莲;高泽霞;钱雪桥;王卫民;;团头鲂3个地理种群杂交效果的配合力和微卫星标记预测[J];水产学报;2012年06期

3 易少奎;高泽霞;罗伟;段晓克;李艳和;王卫民;;团头鲂EST-SSR在厚颌鲂中的跨种扩增及杂交F_1的鉴定[J];水产学报;2013年07期

中国硕士学位论文全文数据库 前6条

1 温久福;团头鲂Kiss2/Kiss2R系统对其生殖调控的初步研究[D];华中农业大学;2013年

2 张新辉;团头鲂三倍体和雌核发育的诱导及其主要生物学特性的研究[D];华中农业大学;2013年

3 杜睿;基于形态学和微卫星标记的鲂属鱼类种间及子代的鉴定[D];华中农业大学;2014年

4 陈婷婷;团头鲂源嗜水气单胞菌流行病调查及致病性、耐药性研究[D];华中农业大学;2014年

5 胥辉;团头鲂池塘养殖模式与养殖效益分析[D];苏州大学;2013年

6 陈丽萍;饥饿再投喂对团头鲂幼鱼生肌调节因子表达和肌肉特性的影响[D];华中农业大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 韦新兰;张杰;陈丽萍;王卫民;高泽霞;王焕岭;;团头鲂SPATA4基因的分子克隆及表达分析[J];华中农业大学学报;2013年03期

2 苏利娜;丁祝进;李鸿;周凤娟;王卫民;刘红;;团头鲂Dmrt4基因的克隆与表达分析[J];华中农业大学学报;2013年06期

3 郗明君;刘立春;张涓;汤孝成;刘小玲;林蠡;;3种壳聚糖对团头鲂体外头肾吞噬细胞呼吸爆发功能的影响[J];华中农业大学学报;2014年03期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 林帆;刘清华;李军;隋娟;肖志忠;徐世宏;马道远;肖永双;;真鲷(Pagrus major)vasa基因5′端启动子克隆及表达载体构建[J];海洋与湖沼;2011年02期

2 ;[J];;年期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 田丽芳;集胞藻6803中ndhK基因启动子结构与功能的初步分析[D];上海师范大学;2013年

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本文编号：1106286