大豆氮素利用效率相关基因的克隆及功能验证

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大豆氮素利用效率相关基因的克隆及功能验证

     论文目录

摘要第1-7页

Abstract第7-14页

英文缩略表第14-15页

第一章 引言第15-43页

   ·氮素营养概述第15-16页

     ·植物中氮的作用第15页

     ·氮肥利用现状及相关问题第15-16页

     ·NUE 的定义第16页

   ·氮素从根际到种子的途径第16-19页

     ·根诱导的根际土壤中氮的形态和浓度的变化第16页

     ·氮的获取第16页

     ·氮素同化第16-18页

     ·氮素运输及再动员第18页

     ·氮从根的流出第18页

     ·地上部分挥发性氮的损失第18-19页

   ·遗传学角度分析氮素利用效率的差异第19页

     ·同种植物的不同基因型的自然差异第19页

     ·在氮限制和氮充足条件下 NUE 的变异第19页

   ·土壤氮和肥料氮的农学效率第19-20页

     ·土壤和肥料的氮利用效率第19-20页

     ·集约化农业的养分资源综合管理第20页

   ·氮素吸收效率第20-24页

     ·根系氮调节第20页

     ·硝酸盐转运蛋白的功能第20-22页

     ·铵转运蛋白的功能第22-24页

     ·尿素转运蛋白的功能第24页

     ·与激素的耦合第24页

   ·氮素生理利用效率第24-28页

     ·氮同化效率第24-25页

     ·氮转运及再动员效率第25-26页

     ·与碳代谢和运输的耦合第26-28页

     ·CO2 浓度和温度升高条件下氮利用效率第28页

     ·种子质量和贮藏蛋白第28页

   ·提高氮素利用效率的方法第28-34页

     ·根系结构和活性维持第31页

     ·硝酸盐和铵转运蛋白过表达第31-32页

     ·控制氮平衡和其他代谢平衡的关键基因的调控第32页

     ·细胞内酸碱平衡第32-33页

     ·提高产量和氮收获指数以促进氮素的获取和利用第33页

     ·高 NUE 的分子标记辅助育种第33-34页

   ·植物氮营养高效基因型的选择指标第34页

   ·大豆氮素营养研究进展第34-36页

     ·大豆的重要性第34页

     ·大豆氮的积累与分布第34-35页

     ·根瘤固氮的研究第35页

     ·施用氮肥与大豆产量的关系第35-36页

   ·新一代测序技术的发展及应用第36-41页

     ·新一代 DNA 测序平台第36-38页

     ·新一代测序技术在生物学研究中的应用第38-41页

   ·本研究的目的和意义第41-43页

第二章 大豆耐低氮品种的筛选第43-54页

   ·材料和方法第43-46页

     ·植物材料第43-44页

     ·主要仪器设备和试剂第44页

     ·试验方法第44-45页

     ·测定项目和方法第45-46页

     ·数据分析第46页

   ·结果与分析第46-53页

     ·不同品种低氮条件下叶片黄化程度第46页

     ·大豆苗期各性状指标的变异第46-47页

     ·不同氮水平下大豆各性状指标的相关性分析第47-51页

     ·耐低氮及氮敏感性资源筛选鉴定第51-52页

     ·筛选的三类大豆相对性状指标的比较第52-53页

   ·讨论与结论第53-54页

第三章 基于高通量测序的氮高效相关基因的鉴定第54-86页

   ·材料和方法第54-66页

     ·试验材料第54页

     ·试验方法第54-66页

   ·结果与分析第66-82页

     ·测序质量评估第66-67页

     ·测序的饱和度分析第67-68页

     ·DGE 数据库总析第68页

     ·Clean tags 拷贝数分布的统计分析第68-69页

     ·Clean tag 比对统计第69-71页

     ·基因表达注释第71页

     ·差异表达基因筛选第71-73页

     ·Gene Ontology 功能显著性富集分析第73-74页

     ·Pathway 显著性富集分析第74-76页

     ·差异表达基因功能分析第76-80页

     ·Solexa/Illumina 高通量测序结果的可靠性验证第80-82页

   ·讨论与结论第82-86页

     ·氮代谢相关基因第82-83页

     ·转录因子和蛋白激酶的调节第83-84页

     ·其他相关差异基因第84-85页

     ·结论第85-86页

第四章 低氮调控相关基因的克隆和表达分析第86-107页

   ·实验材料第86-87页

     ·植物材料第86-87页

     ·菌株与质粒第87页

     ·主要试剂第87页

     ·PCR 引物和测序第87页

   ·试验方法第87-92页

     ·目标基因 cDNA 全长的克隆第87-88页

     ·目标基因表达特征分析第88-89页

     ·基因序列的生物信息学分析第89页

     ·目标基因亚细胞定位第89-92页

   ·结果与分析第92-105页

     ·大豆总 RNA 提取结果第92-93页

     ·Gmduf-cbs 和 Gmdof1.4 基因的克隆第93-94页

     ·Gmduf-cbs 和 Gmdof1.4 基因表达分析第94-96页

     ·基因编码蛋白的生物信息学分析第96-103页

     ·目标基因亚细胞定位第103-105页

   ·讨论第105-107页

     ·Gmduf-cbs 基因功能初探第105页

     ·关于转录因子的研究第105-106页

     ·基因的时空表达谱分析第106-107页

第五章 Gmduf-cbs基因的功能分析第107-125页

   ·材料和方法第107-116页

     ·试验材料第107页

     ·试验方法第107-116页

   ·结果分析第116-123页

     ·潮霉素筛选浓度的确定第116页

     ·拟南芥阳性植株的筛选第116-117页

     ·转基因植株的 PCR 检测第117页

     ·实时荧光定量 PCR 检测转基因植株第117-118页

     ·转基因植株的 Southern 杂交验证第118-119页

     ·Gmduf-cbs 表达对氮利用途径相关基因表达的影响第119-120页

     ·Gmduf-cbs 转基因植株在低氮环境下的长势第120-121页

     ·Gmduf-cbs 基因表达对植株生长及氮同化的影响第121-123页

   ·讨论与结论第123-125页

第六章 Gmdof1.4 基因的功能分析第125-134页

   ·材料和方法第125-126页

     ·试验材料第125页

     ·试验方法第125-126页

   ·结果分析第126-132页

     ·转基因植株的 PCR 检测第126-127页

     ·实时荧光定量 PCR 检测转基因植株第127页

     ·转基因植株的 Southern 杂交验证第127-128页

     ·Gmdof1.4 基因表达对氮利用途径相关基因表达的影响第128-129页

     ·Gmdof1.4 基因表达的低氮响应第129-130页

     ·Gmdof1.4 基因表达对植株生长及氮同化的影响第130-132页

   ·讨论与结论第132-134页

全文结论第134-135页

参考文献第135-156页

附录第156-158页

致谢第158-159页

作者简历第159页

论文编号BS2076014，这篇论文共159页
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