活血定眩胶囊对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3基因表达谱的影响及生物信息学分析

发布时间：2018-01-24 07:34

本文关键词： 活血定眩胶囊小鼠脑微血管内皮细胞基因芯片抗氧化 bEnd.细胞　出处：《中草药》2017年08期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨活血定眩胶囊含药血清对体外培养小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3基因表达谱的影响及作用的分子机制。方法将30只大鼠随机分为对照组和活血定眩胶囊组,2组分别ig给予7.5 g/kg活血定眩胶囊和等量生理盐水,连续7 d,采集2组大鼠血清。将bEnd.3细胞分为对照组、模型组、10%活血定眩胶囊含药血清组,给药后,bEnd.3细胞缺氧6 h。激光显微镜下观察细胞骨架,运用Affymetrix U133 plus2.0基因组表达芯片检测活血定眩胶囊对bEnd.3细胞基因表达谱的影响,应用分子注释系统MAS3.0软件进行聚类分析。结果根据P0.01,|Fold Change|3筛选差异基因,对照组与模型组之间共有405个差异基因,其中表达上调的有176个,表达下调的有229个。活血定眩胶囊含药血清组与模型组之间共有368个差异基因,其中表达上调的有146个,表达下调的有222个。这些共同的差异基因生物功能包括内皮细胞迁移的正调控、含氧酸代谢过程、血管内皮生长因子的产生、核转录因子-κB(NF-κB)活性的正向调节等,参与的信号通路包括氧化应激诱导的衰老、有丝分裂前期、血小板聚集(堵塞形成)、血管内皮生长因子信号通路、白细胞介素信号通路、p53通路、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路、凋亡信号通路等信号通路。结论活血定眩胶囊对缺氧所致bEnd.3细胞的损伤具有明显的对抗作用,其机制与氧化应激、抑制细胞凋亡、促进血管内皮新生、炎症及免疫反应有关,活血定眩胶囊在基因水平通过多条通路调节血管内皮细胞功能。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Huoxue Dingxuan capsule (Huoxue Dingxuan capsule) on bEnd.3 gene expression profile of mouse brain microvascular endothelial cells in vitro and its molecular mechanism. Methods Thirty rats were randomly divided into control group and blood activating group. Dingxuan capsule group. The two groups were given 7.5 g / kg Huoxue Dingxuan capsule and the same amount of normal saline intravenously for 7 days. The serum samples of the two groups were collected. The bEnd.3 cells were divided into control group and model group. 10% Huoxue Dingxuan capsule containing serum group. The cytoskeleton was observed under laser microscope. The effect of Huoxue Dingxuan capsule on gene expression profile of bEnd.3 cells was detected by Affymetrix U133 plus2.0 genomic expression microarray. Molecular annotation system (MAS3.0) was applied to cluster analysis. Results differential genes were screened according to P0.01 and Fold Change 3. There were 405 differentially expressed genes between the control group and the model group, of which 176 were up-regulated. There were 229 down-regulated genes. There were 368 differentially expressed genes between the serum containing Huoxue Dingxuan capsule and the model group, of which 146 were up-regulated. There are 222 down-regulated genes. These common gene biological functions include the positive regulation of endothelial cell migration, the metabolism of oxygen-containing acid, and the production of vascular endothelial growth factor. The positive regulation of NF- 魏 B activity in nuclear transcription factor-魏 B is involved in the signal pathways including senescence induced by oxidative stress, premitotic phase, platelet aggregation (clogging). Vascular endothelial growth factor signaling pathway, interleukin signaling pathway p53 pathway, tumor necrosis factor- 伪 TNF- 伪 signal pathway. Peroxisome proliferator activated receptor (PPAR) signaling pathway and phosphatidylinositol 3 kinase-protein kinase (PI3K-Akt) signaling pathway. Conclusion Huoxue Dingxuan capsule has obvious antagonistic effect on bEnd.3 cell damage induced by hypoxia, its mechanism and oxidative stress inhibit apoptosis. Promoting vascular endothelial neogenesis, inflammation and immune response, Huoxue Dingxuan capsule regulates vascular endothelial cell function through multiple pathways at gene level.
【作者单位】：甘肃中医药大学;甘肃中医药大学附属医院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81360554) 甘肃省中药现代制造工程研究院项目(YWW-2015049)
【分类号】：R285.5
【正文快照】： 椎动脉型颈椎病是指由于颈椎发生病变引起椎动脉血流障碍,从而导致脑供血不足,临床上出现以眩晕、耳鸣、头痛等为主要症状的一系列症候群[1]。目前,西医治疗以对症处理为主要原则,缺乏针对椎动脉型颈椎病进行治疗的特异性药物。而中药因其“治病求本”的原则,其治疗椎动脉型颈

【参考文献】

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3 宋敏;温孝明;郭成龙;蒋宜伟;;活血定眩丸对治疗椎动脉型颈椎病血液流变学的影响[J];时珍国医国药;2013年09期

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5 宋敏;董万涛;;活血定眩丸对CSA大鼠血液流变学及小脑Bcl-2、Bax表达的影响[J];中国中医骨伤科杂志;2012年08期

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10 李清林;宋敏;孙定平;孙彬霄;刘涛;巩彦龙;柴居堂;刘晓;;活血定眩胶囊对CSA模型大鼠椎动脉血流量及血浆PAI、t-PA水平的影响[J];四川大学学报(医学版);2016年06期

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6 龙吉美;黄德彬;李魁武;罗琼;;钩藤碱对阿霉素诱导的大鼠肾损伤的作用及其机制[J];中国病理生理杂志;2012年10期

7 汪江涛;丁伯平;柏松;陈莉;黄帧桧;;钩藤碱对肾性高血压大鼠心肌中叶素及其受体表达的影响[J];中成药;2013年06期

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9 魏强;李静;刘艺;赵亮;夏菁;游智梅;李丹阳;陈地龙;;MAPK信号转导通路在人参多糖诱导白血病K562细胞凋亡中的作用[J];中草药;2013年02期

10 窦月;周洪雷;齐冬梅;李运伦;陈凯;;离子交换树脂对钩藤总生物碱的纯化工艺[J];中国实验方剂学杂志;2012年03期

【二级参考文献】

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3 王群,李江疆;钩藤碱对心血管系统部分药理作用研究[J];宁夏医学杂志;1998年05期

4 宋纯清,樊懿,黄伟晖,吴大正,胡之璧;钩藤中不同成分降压作用的差异[J];中草药;2000年10期

5 韩伟,欧阳甲,刘克,王金红;椎动脉型颈椎病的MRA分型及临床意义[J];中国脊柱脊髓杂志;2001年01期

6 朱明双,郑重,黄勇,胡晓梅,杨松涛;注射硬化剂法制作家兔颈椎病椎动脉型模型──脑干听觉诱发电位实验研究[J];成都中医药大学学报;2000年03期

7 刘郁,张海鹏;缺血缺氧性脑损伤病理机制[J];中华急诊医学杂志;2003年07期

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