LIM同源盒基因8对卵巢癌细胞SKOV3生物学行为的影响

发布时间：2018-02-15 01:52

  本文关键词： 卵巢肿瘤 LIM同源盒基因 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤侵袭　出处：《第二军医大学学报》2017年06期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨LIM同源盒基因8(Lhx8)对卵巢癌细胞株SKOV3增殖、转移和侵袭的影响。方法采用Lhx8过表达慢病毒(LV-Lhx8)转染卵巢癌细胞株SKOV3构建过表达模型;设阴性对照慢病毒(LV-NC)组通过Lipofectamine 2000转染Lhx8-siRNA构建细胞干扰模型并设阴性对照序列(FAM-siRNA;NC)组;野生(WT)组细胞仅给予等量不含病毒或任何干扰片段的转染试剂。通过免疫荧光、蛋白质印迹法和qPCR验证过表达和干扰效果。采用EDU和细胞周期实验检测过表达或干扰Lhx8后细胞的增殖能力;采用Transwell和划痕实验分别检测转染后细胞的迁移和侵袭能力。结果 Lhx8过表达组SKOV3细胞中Lhx8的表达高于LV-NC和WT组(P0.01),干扰后Lhx8的mRNA和蛋白表达均降低,与NC和WT组相比差异有统计学意义(P0.01)。与WT和LV-NC组相比,Lhx8过表达抑制SKOV3细胞的增殖(P0.01),而干扰Lhx8后其增殖能力增加(P0.01);细胞周期实验结果示过表达Lhx8能够增加进入G0/G1期的细胞数目,从而抑制细胞增殖(P0.01),干扰Lhx8表达后进入S期的细胞数目多于WT和NC组(P0.01)。划痕和Transwell实验结果示SKOV3细胞过表达Lhx8后其迁移和侵袭能力均低于WT和LV-NC组(P0.01),干扰Lhx8表达后细胞的迁移和侵袭能力均高于WT和NC组(P0.01)。SKOV3细胞过表达Lhx8后基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达均低于WT和LV-NC组(P0.01),干扰Lhx8后MMP-2、MMP-9表达均高于WT和NC组(P0.01)。结论 Lhx8能够抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,同时能够下调MMP-2和MMP-9的表达。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of LIM homologous box gene 8 (Lhx8) on the proliferation, metastasis and invasion of ovarian cancer cell line SKOV3. Methods the overexpression model of ovarian cancer cell line SKOV3 was constructed by Lhx8 overexpression lentivirus LV-Lhx8. The negative control lentivirus lentivirus LV-NCgroup was used to construct the cell interference model by Lipofectamine 2000 transfection and the negative control sequence was set up to establish the FAM-siRNA-NCCgroup, while the wild control group was only given the same amount of transfection reagent without virus or any interference fragments. The effects of overexpression and interference were verified by Western blot and qPCR. EDU and cell cycle assay were used to detect the proliferative ability of cells after overexpression or interference with Lhx8. Results the expression of Lhx8 in SKOV3 cells in Lhx8 overexpression group was higher than that in LV-NC and WT groups, and the expression of mRNA and protein in Lhx8 decreased after interference. Compared with NC and WT groups, the overexpression of Lhx8 inhibited the proliferation of SKOV3 cells, but increased the proliferation ability of SKOV3 cells after interfering with Lhx8. The results of cell cycle test showed that overexpression of Lhx8 could increase the number of cells entering G0 / G1 phase. The number of cells entering S phase after interfering with Lhx8 expression was higher than that in WT and NC groups. The results of scratch and Transwell experiments showed that the migration and invasion ability of SKOV3 cells after overexpression of Lhx8 was lower than that of WT and LV-NC groups, and that after interfering with Lhx8 expression, the migration and invasion ability of SKOV3 cells was lower than that of WT and LV-NC groups. The expression of matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) and matrix metalloproteinase (MMP-9) in WT and LV-NC groups were lower than those in WT and LV-NC groups, and the expression of MMP-2 and MMP-9 in WT and NC groups were higher than those in WT and NC groups. Conclusion Lhx8 can inhibit the proliferation of SKOV3 cells. Migration and invasion can down-regulate the expression of MMP-2 and MMP-9.
【作者单位】： 上海交通大学附属第六人民医院南院妇产科;南通大学医学院解剖教研室;上海交通大学附属第六人民医院妇产科;
【分类号】：R737.31

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