番茄NP24基因超表达载体的构建
本文关键词: 番茄 类甜蛋白 超表达载体 农杆菌 出处:《中国农学通报》2016年16期 论文类型:期刊论文
【摘要】:根据NCBI上提供的NP24基因(Gen Bank登录号为543979)的序列,设计全长引物,扩增编码区c DNA,通过克隆至中间载体p MD18-T,将类甜蛋白基因NP24插入植物表达载体PBI121,构建超表达载体PBI121-NP24,采用Ca Cl2冻融法将其转入农杆菌EHA105菌株中。酶切鉴定表明,目的基因已经正确地插入到PBI121载体中,超表达载体构建成功。菌液PCR鉴定,超表达载体已转入农杆菌中。
[Abstract]:A full-length primer was designed based on the sequence of NP24 gene Gen Bank (accession number 543979) provided by NCBI. The coding region was amplified and cloned into the intermediate vector pMD18-T. the sweet protein-like gene NP24 was inserted into the plant expression vector PBI121. the superexpression vector PBI121-NP24 was constructed and transferred into Agrobacterium tumefaciens EHA105 strain by Ca Cl2 freeze-thaw method. Objective the gene was inserted into the PBI121 vector correctly and the superexpression vector was successfully constructed. The superexpression vector was identified by PCR and transferred into Agrobacterium tumefaciens.
【作者单位】: 北京农学院植物科学技术学院;
【基金】:科技部“中俄主要蔬菜基因资源多样化比较研究”(2011DFR31180-3)
【分类号】:S641.2
【参考文献】
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【共引文献】
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本文编号:1535269
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