猪STC-1 siRNA设计及其基因沉默效率检测

发布时间：2018-03-11 15:10

  本文选题：猪　切入点：斯钙素　出处：《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2017年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：根据猪肌肉斯钙素(STC)mRNA序列设计3对小干扰RNA(siRNA)、阴性对照siRNA,转染PK15细胞后,通过荧光观察转染效率和基因表达效率,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)及Western blot测定细胞内siRNA基因沉默后STC-1siRNA及蛋白的表达水平。结果表明:3个STC-1siRNA转染细胞后均有较高的荧光信号;STC-132细胞组STC-1mRNA和STC-1蛋白相对表达水平都最低,该组与其他组差异极显著。结果说明成功设计出STC-1siRNA序列,为后续通过调控STC-1表达研究其在肌肉发育中的功能奠定了基础。
[Abstract]:Three pairs of siRNAs with small interference RNAs and negative control siRNAs were designed according to the siRNA sequence of porcine musculocalskalcin (STC). After transfection of siRNAs into PK15 cells, the transfection efficiency and gene expression efficiency were observed by fluorescence. The expression levels of STC-1siRNA and protein after siRNA gene silencing were measured by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. The results showed that the relative expression levels of STC-1mRNA and STC-1 were the lowest in all three STC-1siRNA transfected cells. The results showed that the STC-1siRNA sequence was successfully designed, which laid a foundation for the further study of its function in muscle development by regulating the expression of STC-1.
【作者单位】： 扬州大学兽医学院/江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(31272405) 江苏高校优势学科建设工程项目(2014-09) 江苏高校品牌专业建设工程项目(TAAP 2015-2018)
【分类号】：S828

【相似文献】

相关期刊论文 前2条

1 李旭艳;邵淑丽;恽冬泽;;MDR1基因shRNA真核表达质粒的构建[J];黑龙江畜牧兽医;2014年03期

2 ;[J];;年期

相关博士学位论文 前2条

1 吴欣玉;猪Prdx6和Prdx2基因功能和转录调控分析[D];华中农业大学;2016年

2 田占成;两种血蜱卵源基因的鉴定及抗蜱免疫保护效应的研究[D];中国农业科学院;2010年

相关硕士学位论文 前10条

1 王素艳;残缘璃眼蜱subolesin和半胱氨酸蛋白酶基因生物学功能初步研究[D];中国农业科学院;2015年

2 蔡珍珍;鸭肠炎病毒编码microRNAs靶基因的预测及dev-miR-D13-5p对病毒增殖影响的初步研究[D];四川农业大学;2016年

3 王顺红;鸡miR-1704靶基因的初步鉴定及生物学功能研究[D];河南农业大学;2015年

4 李冲;猪MyoD、MSTN基因RNA干扰及其功能相互关系的研究[D];东北农业大学;2007年

5 程波;猪zfx基因RNAi片段的筛选及性控效果的观察[D];石河子大学;2014年

6 谢书宇;ZAR1和GDF9基因的克隆及其在新西兰白兔的差异表达研究[D];河南农业大学;2015年

7 王云洁;小鼠转录增强因子（TEF-1）下游靶基因的鉴定及猪SMYD家族三个基因的进化、表达与SNP筛查[D];华中农业大学;2010年

8 袁龙;靶向H、N基因siRNA抑制Vero细胞中CDV的增殖研究[D];吉林大学;2015年

9 吴秋晗;Tektin4基因遗传变异及其对公牛繁殖性能的影响[D];山东师范大学;2014年

10 尹月;鸡TBK1基因的克隆、表达及其对IRF3信号转导通路的影响[D];四川农业大学;2015年

，

本文编号：1598707