番鸭IFITM3基因真核表达载体的构建和表达

发布时间：2018-03-26 12:29

  本文选题：干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM)　切入点：真核表达载体　出处：《黑龙江畜牧兽医》2017年09期

【摘要】：为了研究番鸭干扰素诱导跨膜蛋白3(Interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)在抗病毒感染过程中的作用,试验采用PCR扩增、酶切、连接、转化和质粒提取等方法,将番鸭IFITM3基因构建到真核表达载体p Flag-CMV-5a上。测序正确的质粒转染293T细胞,运用RT-PCR和Western-blot方法鉴定IFITM3的表达情况。结果表明:构建的p Flag-CMV-Anas-IFITM3真核表达载体在293T细胞中可以进行mRNA的正常转录和蛋白的大量表达。说明番鸭IFITM3基因成功构建到p Flag-CMV-5a真核表达载体上,可以在293T模式细胞中大量表达番鸭IFITM3蛋白,并对该蛋白的抗病毒功能和分子机制进行研究。
[Abstract]:In order to study the role of muscovy duck interferon induced transmembrane protein 3(Interferon-induced transmembrane protein 3 IFITM3 in the process of antiviral infection, PCR amplification, restriction endonuclease digestion, ligation, transformation and plasmid extraction were used. The IFITM3 gene of muscovy duck was constructed into eukaryotic expression vector p Flag-CMV-5a. The correctly sequenced plasmid was transfected into 293T cells. RT-PCR and Western-blot methods were used to identify the expression of IFITM3. The results showed that the constructed eukaryotic expression vector of p Flag-CMV-Anas-IFITM3 could carry out the normal transcription of mRNA and the high expression of protein in 293T cells, which indicated that the IFITM3 gene of muscovy duck was successfully constructed into p Flag-CMV-5a. Eukaryotic expression vector, The muscovy duck IFITM3 protein can be expressed in 293T model cells and its antiviral function and molecular mechanism are studied.
【作者单位】： 福建农林大学动物科学学院;
【基金】：福建省教育厅省属高校专项项目(JK2015011) 福建省自然科学基金项目(2016J01090)
【分类号】：Q78;S834

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本文编号：1667910