miR133a通过下调Gdnf基因表达抑制输尿管芽的发育
本文选题:微RNA 切入点:miR133a 出处:《重庆医科大学》2017年硕士论文
【摘要】:该研究预测并验证了在后肾间充质细胞中miR133a对输尿管芽发育关键因子Gdnf(glial cell line derived neurotrophic factor)基因表达的调控作用,探讨了其抑制输尿管芽发育的作用。通过生物信息学分析发现,Gdnf mRNA 3′Untranslated Regions(3′UTR)在不同物种间高度保守,并且存在miR133a等的结合位点。双荧光素酶报告基因实验显示,miR133a可以结合在Gdnf mRNA 3′UTR上。Real-time PCR和Western blot结果证实,mi R133a显著地抑制了Gdnf的mRNA水平和蛋白质水平。 解离重聚‖胚肾离体培养实验结果显示,miR133a抑制输尿管芽的发育。该研究结果表明,miR133a通过靶向结合于Gdnf mRNA的3′UTR,下调Gdnf基因的表达,并抑制输尿管芽的发育。
[Abstract]:This study predicts and verifies the role of miR133a in regulating the expression of Gdnf(glial cell line derived neurotrophic factor, a key factor in the development of ureteral bud, in posterior renal mesenchymal cells, and discusses its role in inhibiting the development of ureteral bud.Through bioinformatics analysis, it was found that Gdnf mRNA 3'Untranslated region ~ (3) UTRs were highly conserved among different species, and that there were binding sites for miR133a et al.The results of double luciferase reporter gene experiment showed that miR133a could bind to Gdnf mRNA 3'UTR. Real-time PCR and Western blot. The results showed that MMI R133a significantly inhibited the mRNA level and protein level of Gdnf.It showed that miR133a inhibited the development of ureteral bud.The results of this study indicate that miR133a down-regulates the expression of Gdnf gene and inhibits the development of ureteral buds by targeting the Gdnf mRNA.
【学位授予单位】:重庆医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R3416
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,本文编号:1718014
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