靶向抑制Id1基因调控Wnt信号通路促进骨肉瘤MG63细胞凋亡

发布时间：2018-04-13 13:40

  本文选题：骨肉瘤 + 分化抑制蛋白质类　； 参考：《肿瘤》2017年09期

【摘要】：目的:研究分化抑制因子1(inhibitor of differentiation 1,Id1)基因对人骨肉瘤细胞MG63凋亡的影响,并探讨可能的作用机制。方法 :通过重组腺病毒感染的方法将特异性针对Id1基因的Id1-si RNA转入骨肉瘤细胞MG63中,分别采用半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测Id1 m RNA和蛋白的表达水平;AnnexinⅤ-FITC单染法及DAPI染色法检测对细胞凋亡的影响,FCM法检测对细胞周期分布的影响。蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和survivin,以及Wnt信号通路关键蛋白β-链蛋白(β-catenin)、受体酪氨酸激酶样孤儿受体(2receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 2,ROR2)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)蛋白的表达水平。结果:采用重组腺病毒Ad-Id1-siR NA感染MG63细胞后,Id1 mR NA及蛋白的表达水平均明显下调(P值均0.05);AnnexinⅤ-FITC单染法和DAPI染色检测结果显示,沉默Id1基因表达后MG63细胞的凋亡率明显提高(P值均0.05);半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,抗凋亡因子Bcl-2和survivin mR NA及蛋白的表达水平均明显下调(P值均0.05);蛋白质印迹法检测结果显示,Wnt信号通路关键蛋白β-catenin以及Wnt通路相关蛋白ROR2和CHOP的表达水平均明显下调(P值均0.05)。结论 :靶向沉默Id1基因表达能促进骨肉瘤细胞的凋亡,其作用可能与抑制Wnt信号通路的活性有关。
[Abstract]:Aim: to study the effect of 1(inhibitor of differentiation 1 / Id1 gene on apoptosis of human osteosarcoma cell line MG63, and to explore the possible mechanism.Methods: Id1-si RNA specific for Id1 gene was transfected into osteosarcoma cell line MG63 by recombinant adenovirus infection.The expression level of Id1 m RNA and protein was detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blotting respectively. Annexin 鈪，

本文编号：1744779