拟南芥蛋白激酶基因BIN2的原核表达纯化及其酶活性分析

发布时间：2018-04-17 06:38

  本文选题：BIN + SUMO　； 参考：《西北林学院学报》2017年03期

【摘要】：为了研究蛋白激酶BIN2(BR-insensitive-2)的底物及其在BR信号通路中的作用机制,通过One Step Cloning方法将BIN2基因克隆至SUMO表达载体,利用SUMO标签促进目的蛋白表达和折叠的特性,对BIN2蛋白进行原核表达和纯化,进而检测BIN2的激酶活性。结果表明,纯化得到的BIN2具有自身磷酸化活性,并测得其酶活大小和动力学曲线。为进一步研究BIN2蛋白的作用机制提供了基础材料。
[Abstract]:In order to study the substrate of protein kinase BIN2 (BIN2) BR-insensitive-2 and its mechanism in Br signaling pathway, the BIN2 gene was cloned into SUMO expression vector by One Step Cloning. SUMO tags were used to promote the expression and folding of the target protein.The prokaryotic expression and purification of BIN2 protein were performed to detect the activity of BIN2 kinase.The results showed that the purified BIN2 had self-phosphorylation activity, and its enzyme activity and kinetic curve were measured.It provides a basic material for further study on the mechanism of BIN2 protein.
【作者单位】： 西北农林科技大学生命科学学院;西北农林科技大学旱区生物质能研究中心;
【基金】：西北农林科技大学引进人才启动项目(Z111021314)
【分类号】：Q946

【参考文献】

相关期刊论文 前7条

1 王玲爽;衣春生;李思楠;张超;马彦龙;金杨媚;李文滨;武小霞;苏安玉;;大豆再生相关基因GmBIN2的克隆及生物信息学分析[J];基因组学与应用生物学;2016年02期

2 李元元;曹清河;;油菜素内酯参与调控植物生长发育与抗逆性的机制及其育种应用研究[J];中国农业科技导报;2015年02期

3 王斐;何伟;闫海芳;;油菜素甾醇信号转导的调控机制[J];植物生理学报;2013年12期

4 亓燕红;邹竹荣;邹华英;范云六;张春义;;SUMO基因的内在原核启动子活性及其在大肠杆菌蛋白表达系统中的应用[J];生物工程学报;2011年06期

5 王凤茹;王志勇;;油菜素内酯信号转导的研究进展[J];华北农学报;2008年S2期

6 李凯荣,韩刚,王红红,侯明;天然油菜素内酯对侧柏苗木抗旱性的影响[J];西北林学院学报;2004年04期

7 李凯荣,韩刚;天然油菜素内酯促进柠条和紫穗槐种子发芽及下胚轴伸长效应[J];西北林学院学报;2003年04期

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 刘欣;张双喜;刘丹;王晓峰;陈少林;;拟南芥蛋白激酶基因BIN2的原核表达纯化及其酶活性分析[J];西北林学院学报;2017年03期

2 刘海娇;李凯明;杨小玉;孙萌;张子龙;;植物生长调节剂在中药材栽培上的应用[J];中国农学通报;2017年10期

3 华智锐;李小玲;;油菜素内酯对小麦幼苗抗旱性的诱导效应[J];江苏农业科学;2017年01期

4 李宁;刘炳梅;陈雪梅;;油菜素内酯合成基因DWF1、DET2影响毛白杨木质部形成[J];广东农业科学;2016年07期

5 任鸿雁;王莉;马青秀;吴光;;油菜素内酯生物合成途径的研究进展[J];植物学报;2015年06期

6 Yanwei CHENG;Jianming HAN;He DING;Huiyuan YA;Yonghui LI;;Effects of Natural Brassinolide on Seed Germination and Hypocotyl Elongation of Beans[J];Agricultural Biotechnology;2015年05期

7 韩园园;韩刚;李凯荣;;油菜素内酯对土壤石油污染下刺槐幼苗生长的影响[J];西北林学院学报;2015年04期

8 王梦姣;邓百万;杨国鹏;;拟南芥油菜素内酯的合成、修饰、信号转导及其在农作物育种中的应用研究进展[J];河南农业科学;2015年02期

9 习世宏;褚祥;;油菜素内酯对花椒幼苗生长和抗旱性影响[J];陕西林业科技;2014年05期

10 程彦伟;丁贺;韩建明;郑建;;天然油菜素内酯对豆类种子发芽和胚根下胚轴伸长的影响[J];江苏农业科学;2014年09期

【二级参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 李思楠;张超;马彦龙;姜成涛;王玲爽;王传奇;于以成;李文滨;苏安玉;武小霞;;外源2,4-D对大豆再生过程的影响[J];基因组学与应用生物学;2015年06期

2 韩飞;刘勇;;中国大豆蛋白产业现状及发展方向[J];大豆科技;2013年03期

3 ;Brassinosteroid Signaling and Application in Rice[J];遗传学报;2012年01期

4 周培;封淑颖;邹竹荣;李雪娇;詹晓莹;曹丽娟;;人脂联素在大肠杆菌中的可溶性表达[J];四川大学学报(自然科学版);2010年01期

5 於丙军,刘友良;盐胁迫对一年生盐生野大豆幼苗活性氧代谢的影响[J];西北植物学报;2003年01期

6 李凯荣,贺秀贤,王乃江;天然油菜素内酯对沙棘种子萌发和下胚轴伸长的影响[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2002年03期

7 邹华文;表高油菜素内酯浸种对提高玉米幼苗抗旱性的影响[J];湖北农学院学报;2002年01期

8 李凯荣,樊金拴;新型植物激素——油菜素内酯类在农林上的应用研究进展[J];干旱地区农业研究;1998年04期

9 王玉琴,罗文华,徐如涓,赵毓橘;表油菜素内酯对西瓜生长和产量性状的影响(简报)[J];植物生理学通讯;1994年06期

10 朱广廉;;油菜素甾醇类植物激素的研究进展[J];植物生理学通讯;1992年05期

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 孙军;;浅谈原核表达的技巧[J];大学时代;2006年07期

2 金元昌;李景鹏;李会东;周建红;;重组促性腺激素释放激素基因原核表达的影响因素[J];湘潭师范学院学报(自然科学版);2006年02期

3 韩钰;王艳林;;小鼠精胺氧化酶的原核表达与鉴定[J];生物技术通讯;2007年01期

4 朱向前;杨静;丁晓然;王升启;;重组人磷脂爬行酶1的原核表达及纯化[J];生物技术通讯;2011年06期

5 哲名家;张淼涛;云涛;王玢tx;刘光清;;兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2012年04期

6 谢海燕,郭霄峰;猪α-干扰素的原核表达[J];华南农业大学学报;2004年04期

7 孙东波;冯力;刘杰;时洪艳;佟有恩;刘胜旺;童光志;;猪传染性胃肠炎病毒n基因的原核表达及重组蛋白的免疫活性分析[J];病毒学报;2006年02期

8 孙军;王俊杰;秦波;伏秀青;高倩倩;王兴智;朱筱娟;;粘着斑激酶的原核表达、纯化及抗体的制备[J];分子科学学报;2007年02期

9 戴华;郑佳玉;陈俊华;潘志明;焦新安;;鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定[J];中国预防兽医学报;2009年10期

10 汤承;张兆敏;岳华;;鸡热休克蛋白70基因的克隆及原核表达[J];西南民族大学学报(自然科学版);2011年03期

相关会议论文 前10条

1 马文涛;闫若潜;吴志明;刘光辉;盛敏;谢彩华;;猪白细胞介素-6的原核表达及其生物学活性研究[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年

2 丁梦蝶;鲁丹;王红宁;田浪;阳泰;张毅;樊汶樵;郭自成;;禽传染性支气管炎病毒多基因串联表位抗原的原核表达研究[A];四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会论文集[C];2011年

3 林海波;张桂红;詹国英;廖明;任涛;罗开健;曹伟胜;徐成刚;辛朝安;;猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年

4 隋桂琴;左玲;王桂云;;人碱性成纤维细胞生长因子的原核表达[A];中国眼底病论坛·全国眼底病专题学术研讨会论文汇编[C];2008年

5 黄斯勇;梁英民;韩骅;李国辉;伍艳兰;康志杰;何飞;张萍;徐恒;刘利;;人Detla-like4ext-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

6 张红;刘志国;屈伸;;人源受体相关蛋白的原核表达优化及功能检测[A];湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会论文摘要汇编[C];2004年

7 袁志栋;王志亮;刘雨田;吴晓东;刘海生;;水貂朊蛋白前体基因的克隆与原核表达[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年

8 王士友;张耀洲;;一个新的家蚕基因的克隆、原核表达及纯化[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年

9 伍艳兰;黄斯勇;牛晓丽;张丽;陈茹菲;何飞;张萍;梁英民;刘利;;人Delta-like4ext-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

10 马文涛;闫若潜;吴志明;刘光辉;盛敏;谢彩华;;猪白细胞介素-6的原核表达及其生物学活性研究[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会论文集[C];2010年

相关博士学位论文 前8条

1 张晓鸣;人IL-16的原核表达与其功能的初步研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2000年

2 曹秀利;杨树PtCDD基因的原核表达及酶活分析[D];南京林业大学;2008年

3 黄新河;小鼠TAp63γ的原核表达、纯化、结构及功能初步研究[D];四川大学;2007年

4 张大鹏;VP60蛋白的原核表达、抗体制备及VP60基因转化的研究[D];西北农林科技大学;2012年

5 张少斌;豌豆肌动蛋白异型体（PEAc1）的原核表达及其藻荧光探针的研制[D];中国农业大学;2004年

6 尹国华;利用Red重组系统构建dsRNA原核表达体系抗烟草花叶病毒的研究[D];山东农业大学;2009年

7 韩凌霞;猪圆环病毒2型基因的原核表达与单克隆抗体的制备及感染性分子克隆的动物接种试验[D];中国农业科学院;2003年

8 于扬;重组人源GPx4及其模拟物的原核表达、结构与功能的研究[D];吉林大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 周鹏;结核分枝杆菌特异性蛋白的原核表达、纯化及免疫原性分析[D];安徽医科大学;2015年

2 高小磊;六种结核分枝杆菌特异性抗原的原核表达及16 KD-38 KD和Ag85A血清学诊断效果的研究[D];兰州大学;2015年

3 彭传林;家蝇抗真菌肽MAF-1原核表达体系优化与活性分析[D];贵阳医学院;2015年

4 钟树怀;猪囊尾蚴膜联蛋白的原核表达及其免疫反应性分析[D];贵阳医学院;2015年

5 孙明潭;猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF7基因的原核表达及ELISA方法的建立[D];河北农业大学;2015年

6 张良斌;天祝白牦牛KAP家族基因克隆、原核表达及其在皮肤中的表达分析[D];西北民族大学;2015年

7 达小强;牦牛转铁蛋白基因克隆与原核表达[D];西北民族大学;2015年

8 高翠娥;飞蝗2个CYP450转基因果蝇品系对杀虫剂的敏感性及原核表达[D];山西大学;2015年

9 吴雨航;布氏杆菌病间接ELISA方法的建立及吉林省梅花鹿主要养殖地区鹿布病血清学调查[D];吉林农业大学;2015年

10 姜旭;百合无症病毒16kDα基因的克隆、原核表达及亚细胞定位[D];大连理工大学;2015年

，

本文编号：1762484