玳玳花瓣脂氢过氧化物裂解酶基因cDNA的克隆及原核表达

发布时间：2018-08-29 14:37

【摘要】：以玳玳花瓣为材料,采用RT-PCR和RACE技术,克隆了玳玳HPL基因cDNA全长,全长为1 776 bp,其中包含52 bp的5′非编码区,224 bp的3′非编码区,1 500 bp的编码区(编码499个氨基酸,分子量为55.7 ku)。将该HPL基因cDNA编码区的核苷酸序列及所推导的氨基酸序列与其他植物的HPL基因cDNA序列进行比较,推断玳玳花瓣HPL属于13-HPL类。通过PCR扩增得到了玳玳HPL基因组全长。测序结果显示玳玳HPL基因中包含1个长2 374 bp的内含子。将分离出来的玳玳HPL基因cDNA的编码区序列插入pET-15b载体上构建原核表达载体,在细菌BL21细胞中进行原核表达。结果表明:该编码区片段可在原核细胞中大量表达,其表达产物分子量大小约为55 ku,与13-HPL蛋白的分子量55.7 ku相符。本研究为下一步利用HPL基因cDNA进行遗传转化研究奠定基础,将为花卉香味的遗传改良提供一条新途径。
[Abstract]:The cDNA of the HPL gene was cloned by RT-PCR and RACE techniques. The total length of cDNA was 1 776 bp, which contained the coding region of 1 500 bp (encoding 499 amino acids) in the 5'non-coding region of 52 bp and the 3'noncoding region of 224bp. Molecular weight is 55.7 ku). The nucleotide sequence and deduced amino acid sequence of the cDNA coding region of the HPL gene were compared with the cDNA sequence of the HPL gene of other plants, and it was inferred that HPL belongs to 13-HPL class. The whole genome of HPL was amplified by PCR. The sequencing results showed that the HPL gene contained a 2 374 bp intron. The coding region of cDNA of HPL gene was inserted into pET-15b vector to construct prokaryotic expression vector, which was expressed in bacterial BL21 cells. The results showed that the coding region could be expressed in prokaryotic cells, and the molecular weight of the expressed product was about 55 ku, and the molecular weight of 13-HPL protein was 55.7 ku. This study laid a foundation for the further study of genetic transformation using HPL gene cDNA, and will provide a new way for genetic improvement of flower fragrance.
【作者单位】： 福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所;
【分类号】：S685.99

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张涛;沈文涛;言普;黎小瑛;周鹏;;原核表达dsRNA抗番木瓜畸形花叶病毒的研究[J];热带作物学报;2014年07期

2 梁东;马锋旺;张敏;;苹果S6PDH基因克隆与原核表达[J];西北植物学报;2008年01期

3 姜翠翠;陈桂信;潘东明;吕恃衡;;木奈果实中花青素合成酶基因PsANS的克隆及原核表达分析[J];热带作物学报;2011年11期

4 张军霞;李鼎立;王然;刘成连;原永兵;马春晖;;砂梨CONSTANS基因的克隆及原核表达分析[J];植物遗传资源学报;2014年04期

5 樊磊;张晓东;陈丽梅;苏俊;舒群;李昆志;;云南红梨PyMT基因的克隆、原核表达和功能分析[J];生命科学研究;2011年06期

6 曹颖;胡尚连;张慧莹;唐晓凤;刘永胜;;番茄醇酰基转移酶基因SlAAT1克隆、序列分析和原核表达[J];植物研究;2012年06期

7 代红艳;于翠梅;张志宏;李贺;马跃;刘月学;;利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清[J];果树学报;2013年04期

8 黄艺宁;柯丽娜;程祖锌;;葡萄花青素还原酶基因ORF的克隆与原核表达[J];山地农业生物学报;2011年06期

9 李磊;杨远柱;刘泓;杜长青;林建中;朱咏华;刘选明;;金针菇谷氨酸脱氢酶基因的克隆及原核表达[J];生命科学研究;2013年03期

10 ;[J];;年期

相关会议论文 前2条

1 王秀敏;韩烈保;;豇豆蛋白酶抑制剂基因(CpTI)的克隆及其原核表达[A];全国植物分子育种研讨会摘要集[C];2009年

2 张秋平;谢丙炎;杨宇红;刘志敏;;辣椒CaJERF1基因的克隆及原核表达研究[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年

相关硕士学位论文 前5条

1 谌悦;桃PGIP基因的克隆、原核表达及酵母载体的构建[D];西北农林科技大学;2009年

2 陈瑶;原核表达的dsRNA抗番木瓜环斑病毒的研究[D];海南大学;2012年

3 田晓;CTV p20和p23基因原核表达及不同分离株中p25蛋白与病毒含量分析[D];西南大学;2014年

4 张涛;原核表达的dsRNA诱导番木瓜畸型花叶病毒抗性的研究[D];海南大学;2014年

5 王小华;苹果APX、DHAR基因和猕猴桃GalDH基因的原核表达[D];西北农林科技大学;2009年

，

本文编号：2211503