HPV45-L1和HPV58-L1蛋白植物表达载体的构建及水稻转基因植株的鉴定

发布时间：2018-11-03 08:30

【摘要】：利用水稻胚乳细胞生物反应器,构建含有HPV45-L1和HPV58-L1基因的重组植物表达载体,为HPV-45L1和HPV58-L1蛋白的表达提供一种新的高效、低廉的表达方式。利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV45-L1和HPV58-L1蛋白编码基因,将其重组于中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA-1300中,构建含HPV45-L1和HPV58-L1基因的植物表达载体pCAMBIA-1300-pMP3-HPV45-L1、pCAMBIA-1300-pMP3-HPV58-L1,随后采用根癌农杆菌侵染水稻愈伤组织介导的水稻遗传转化,获得HPV-L1转基因水稻植株。PCR检测结果表明,HPV45-L1和HPV58-L1基因已整合到水稻基因组中,说明已成功构建水稻胚乳特异性表达载体。
[Abstract]:A recombinant plant expression vector containing HPV45-L1 and HPV58-L1 genes was constructed by using rice endosperm cell bioreactor to provide a new efficient and low cost expression method for the expression of HPV-45L1 and HPV58-L1 proteins. Human papillomavirus (HPV) HPV45-L1 and HPV58-L1 protein encoding genes were cloned by PCR technique and recombined into the intermediate vector pMP3 and the plant expression vector pCAMBIA-1300. The plant expression vector pCAMBIA-1300-pMP3-HPV45-L1,pCAMBIA-1300-pMP3-HPV58-L1, containing HPV45-L1 and HPV58-L1 genes was constructed, and then Agrobacterium tumefaciens was used to infect rice callus mediated rice genetic transformation. HPV-L1 transgenic rice plants were obtained. PCR analysis showed that HPV45-L1 and HPV58-L1 genes had been integrated into rice genome, indicating that rice endosperm specific expression vector had been constructed successfully.
【作者单位】： 河南农业大学牧医工程学院;河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室农业部动物免疫学重点实验室;郑州大学生命科学学院;
【基金】：河南省高校科技创新团队和创新人才支持计划(14HASTIT027)
【分类号】：S511;Q943.2

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本文编号：2307257