菠萝泛菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因克

发布时间：2019-01-26 17:13

【摘要】：利用分子克隆的方法,对一种源于菠萝泛菌的内切葡聚糖酶(即β-1,4-内切葡聚糖酶)基因进行克隆、原核表达,利用Ni-NTA吸附柱对表达的重组内切葡聚糖酶进行纯化,分析重组酶的活性。研究结果显示,此重组内切葡聚糖酶含1个1 002 bp的开放阅读框,编码334个氨基酸序列,重组酶在大肠杆菌细胞中的表达量占可溶性蛋白的50%以上,经过纯化获得了纯度高于95%的内切葡聚糖酶蛋白,酶活力可以达到2 245 U/m L。
[Abstract]:By molecular cloning, an endoglucanase gene (尾 -1m4-endoglucanase) from pantobacillus pineapple was cloned and expressed in prokaryotic expression. The recombinant endoglucanase was purified by Ni-NTA adsorption column. The activity of recombinant enzyme was analyzed. The results showed that the recombinant endoglucanase contained an open reading frame of 1 002 bp and encoded 334 amino acid sequences. The expression of recombinant glucanase in Escherichia coli cells accounted for more than 50% of the soluble protein. After purification, endoglucanase protein with purity of more than 95% was obtained, and the enzyme activity could reach 2 245 U / m L.
【作者单位】： 徐州工程学院食品工程学院;
【基金】：江苏省博士后基金项目(1302041B) 江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室开放基金项目(SPKF201411) 徐州市科技计划项目(KC15N0011) 徐州工程学院校级科研课题(XKY2013108);徐州工程学院大学生创新项目(XCX2015118)
【分类号】：Q78;Q55

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 伍红;农向;张琪;秦天莺;黄惟巍;谭德勇;;瑞氏木霉β-内切葡聚糖酶的纯化及其部分酶学性质研究[J];云南大学学报(自然科学版);2009年03期

2 吕杰;金湘;马媛;毛培宏;虞龙;应汉杰;;氮离子诱变筛选内切葡聚糖酶高产菌株及其基因突变研究[J];生物技术;2010年04期

3 管明斌;王艳凤;谢春芳;姚冬生;;毛霉Amylomyces.rouxii HN0512中内切葡聚糖酶的诱导、纯化及性质分析[J];暨南大学学报(自然科学与医学版);2011年05期

4 谭静利;姚淑敏;;热纤梭菌内切葡聚糖酶在酿酒酵母细胞表面上展示研究[J];安徽农业科学;2012年14期

5 汤晓颖,秦俊川,唐国敏,王敖全;瑞氏木霉内切葡聚糖酶基因在工业啤酒酵母中的整合和表达[J];微生物学报;2003年05期

6 廖贵芹;汪娜;马立新;;β-1,4-内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达研究[J];湖北大学学报(自然科学版);2007年02期

7 王海青;孟欣;洪玉枝;刘子铎;;费氏弧菌β-内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学分析[J];农业生物技术学报;2007年06期

8 吴振芳;陈惠;曾民;吴琦;;内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母中高效表达研究[J];农业生物技术学报;2009年03期

9 高培基;曲音波;王祖农;;绿色木霉的内切葡聚糖酶在纤维素水解中作用机制的研究[J];自然科学进展;1992年03期

10 陈惠;胥兵;廖俊华;官兴颖;吴琦;;内切葡聚糖酶基因在巨大芽孢杆菌中的表达及其酶学性质研究[J];遗传;2008年05期

相关会议论文 前9条

1 刘海英;舒正玉;吴松刚;黄建忠;;长梗木霉内切葡聚糖酶基因的克隆与表达研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2009年学术交流会论文摘要汇编[C];2009年

2 陶毅明;安刚;龙敏南;陈清西;;曲霉Aspergillus glaucus内切葡聚糖酶的分离纯化及其性质的研究[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

3 徐荣;张燕琼;杨红;;两株芽孢杆菌的分离及其内切葡聚糖酶和木聚糖酶的活性分析[A];2012年鄂粤微生物学学术年会——湖北省暨武汉微生物学会成立六十年庆祝大会论文集[C];2012年

4 刘海英;王娟;舒正玉;黄建忠;;内切葡聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会论文摘要汇编[C];2008年

5 汪天虹;丁新丽;黄晶;;瑞氏木霉内切葡聚糖酶基因在酿酒酵母中的表达研究[A];山东微生物学会第六次会员代表大会暨2004年学术年会论文集（上）[C];2004年

6 王玉娟;王军;余增亮;;枯草芽孢杆菌JA18内切葡聚糖酶催化域的圆二色和荧光光谱研究[A];第十一次中国生物物理学术大会暨第九届全国会员代表大会摘要集[C];2009年

7 王秋立;倪金凤;申玉龙;;超嗜热古菌Pyrococcus horikoshii β-D-内切葡聚糖酶在毕氏酵母中的表达[A];中国资源生物技术与糖工程学术研讨会论文集[C];2005年

8 冷园园;韩文君;祝磊;李越中;吴志红;;山羊瘤胃宏基因组文库构建及内切葡聚糖酶基因的筛选[A];第二届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会论文摘要集[C];2010年

9 伍红;农向;张琪;谭德勇;秦天莺;;瑞氏木霉发酵液中β-内切葡聚糖酶Eg1、Eg2的纯化及部分酶学性质研究[A];第九届西南三省一市生物化学与分子生物学学术交流会论文集[C];2008年

相关博士学位论文 前8条

1 周烈;耐热、高活性杂合内切葡聚糖酶基因的设计、表达及酶学性质研究[D];浙江大学;2010年

2 林凌;产纤维素酶菌株的筛选和枯草芽胞杆菌内切葡聚糖酶催化活性的改造[D];华中农业大学;2009年

3 刘淑艳;丝状真菌尖镰孢Fusarium oxysporum L19嗜热内切葡聚糖酶的研究[D];山东大学;2006年

4 王磊;转植酸酶和内切葡聚糖酶基因乳酸杆菌的构建及其肉鸡饲喂效果验证[D];西北农林科技大学;2014年

5 王秀娟;嗜热真菌纤维二糖水解酶（CBHⅠ、CBHⅡ）和内切葡聚糖酶（EGⅠ）的分子改造[D];山东农业大学;2011年

6 张亚波;嗜热真菌热稳定纤维素酶的分子改造[D];山东农业大学;2009年

7 范晓静;植物内生细菌GFP标记及两个基因与定殖的关系[D];福建农林大学;2009年

8 封毅;兔子盲肠未培养微生物纤维素酶基因的克隆、表达及产物的酶学特性研究[D];广西大学;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 韦兰芳;匍枝根霉内切葡聚糖酶连接区域结构与功能研究[D];安徽工程大学;2015年

2 何永梅;米曲霉内切葡聚糖酶基因(AoEGLAI)在毕赤酵母中的表达研究及其酶学特性分析[D];上海海洋大学;2015年

3 魏姣;烟曲霉葡聚糖内切酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[D];甘肃农业大学;2015年

4 万玉军;β-葡萄糖苷酶基因和内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的共表达及发酵条件研究[D];四川农业大学;2013年

5 李雨霏;定点突变技术改变大肠杆菌f-10内切葡聚糖酶基因及其性质研究[D];四川农业大学;2013年

6 白利叶;桑青枯菌快速检测靶标内切葡聚糖酶抗体的制备与检测[D];重庆师范大学;2016年

7 胡志刚;转内切葡聚糖酶乳酸杆菌的构建及其对獭兔生产性能和免疫性能的影响[D];西北农林科技大学;2016年

8 秦伟;Bacillus.sp.bs-1的内切葡聚糖酶在大肠杆菌中的表达研究[D];内蒙古农业大学;2011年

9 吴振芳;内切葡聚糖酶基因在毕赤酵母中高效表达及其结构域重构研究[D];四川农业大学;2009年

10 周潭澈;嗜热液化芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因的克隆和表达[D];南京林业大学;2008年

，

本文编号：2415704