茶树硝态氮转运蛋白NRT1.1基因的克隆及表达分析

发布时间：2019-06-05 16:58

【摘要】：以茶树(Camellia sinensis(L.))品种龙井43为试材,采用PCR结合RACE技术,克隆得到硝态氮转运蛋白基因(NRT1.1)的c DNA全长序列,基因序列全长1 880 bp,其中开放阅读框(ORF)1 788 bp,编码595个氨基酸,预测蛋白质分子量为65.9 k D,理论等电点为8.99,命名为Cs NRT1.1。序列分析表明,Cs NRT1.1与葡萄NRT1.1氨基酸序列的相似性最高。通过生物信息学分析,对Cs NRT1.1的氨基酸理化性质、亲/疏水性、跨膜区域及亚细胞定位进行了预测。实时定量PCR表达分析表明,茶树根和叶片中Cs NRT1.1在1 mol·L~(-1) NO3-处理5 min内均受到抑制,叶部Cs NRT1.1表达量0.5 h后即达到最大值,24 h内各个时间点均高于根部,根中表达量Cs NRT1.1始终低于对照。本研究结果为研究茶树对NO3-的吸收、转运和调控机理提供了分子生物学基础。
[Abstract]:With tea tree (Camellia sinensis (L.) Variety Longjing 43 was used to clone the full-length c DNA sequence of nitrate nitrogen transporter gene (NRT1.1) by PCR combined with RACE. The full length of the gene sequence was 1880 bp,. The open reading frame (ORF) 1788 bp, encodes 595 amino acids. The predicted molecular weight of the protein is 65.9 KD, and the theoretical isoelectric point is 8.99, named Cs NRT1.1.. Sequence analysis showed that the similarity between Cs NRT1.1 and grape NRT1.1 amino acid sequence was the highest. The physical and chemical properties, hydrophilicity, transmembrane region and subcellular localization of Cs NRT1.1 were predicted by bioinformatics analysis. Real-time quantitative PCR expression analysis showed that Cs NRT1.1 in tea roots and leaves was inhibited within 5 min treated with 1 mol 路L ~ (- 1) NO3-, and the expression of Cs NRT1.1 in leaves reached the maximum value after 0.5 h. The expression of Cs NRT1.1 in roots was higher than that in roots at all time points within 24 hours, and the expression of in roots was always lower than that in the control. The results of this study provide a molecular biological basis for the study of the mechanism of absorption, transport and regulation of NO3- by tea plants.
【作者单位】： 江苏省农业科学院园艺研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室;中国农业科学院茶叶研究所农业部茶树生物学与资源利用重点实验室;南京农业大学园艺学院作物遗传与种质创新国家重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(31400587) 江苏省自然科学基金(BK20160590) 茶树生物学与资源利用国家重点实验室开放基金(SKLTOF20150114) 江苏省农业科技自主创新资金(CX(16)1003)
【分类号】：S571.1

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3 本报记者 刘e，

本文编号：2493677